Дайджест сайт: Одайджест: кураторская рассылка для дизайнеров

Содержание

Одайджест: кураторская рассылка для дизайнеров

Одайджест: кураторская рассылка для дизайнеров

Знания, навыки, инструменты, новости и вдохновение в одном дайджесте

Подписаться

В каждом выпуске

Вдохновение

25-30 проектов из десятка сфер: фирменные cтили и логотипы, типографика, каллиграфия и леттеринг, плакаты, инфографика, упаковка, сайты, интерфейсы, моушен, иллюстрации

Отборные статьи

5–6 статей с комментарием или краткой
выжимкой. Новости индустрии и новых технологий короткой строкой

Интервью

Свежие интервью с дизайнерами,
арт-директорами и художниками

Инструменты и бесплатные файлы

6-15 ссылок на новые инструменты, плагины, бесплатные исходники для работы

Новые шрифты

с кириллицей

2–4 новых шрифта.
Бесплатные и коммерческие

Цитаты из книг

Подборка ключевых цитат из одной новой книги. Дизайн, типографика, брендинг, искусство и другие темы

Лекции, уроки, фильмы

3–5 ссылок на обучающие материалы: курсы, уроки, лекции, практические статьи или туториалы

Читайте в почте, браузере, Телеграме и ВК. На мобильном и на компе

Доступно 260+ выпусков

Есть отдельный сайт с поиском, рубрикатором и полным архивом

В ботах есть навигация по отдельным выпускам и сквозная по отдельным рубрикам. Для новых выпусков можно оставить только интересные рубрики и отключить ненужные

Выбирают люди, а не алгоритмы

У нас было полтысячи RSS-лент, четыре дюжины почтовых рассылок, профили сотен дизайнеров на бихансах, дриблах, медиумах и фейсбуках, сотня телеграм-каналов, две солонки пабликов в ВК и большой запас отборных статей в Ноушене. Не то, чтобы всё это было категорически необходимо в дайджесте, но если уж начал собирать коллекцию, то к делу надо подходить серьёзно

Команда дайджеста

Кирилл Олейниченко

Куратор, главред

Александр Швецов

Куратор, редактор

Наталья Телятинская

Автор рубрики «Цитаты из книг»

Дарья Дейнека

Интервьюер

Попробуйте бесплатно

Посмотрите реальный выпуск, отправленный подписчикам в октябре 2020 года. Вы можете прочитать его в браузере, в Телеграме и в ВК

Получить выпуск бесплатно

Подписывайтесь

за 249 ₽ в месяц

30 дней возврат денег без вопросов

Свежий дайджест сразу

Новый каждую неделю

Доступ ко всем выпускам (220+)

Удобные боты в Телеграме и ВК

Менее 60 ₽ за дайджест

Thank you! Your submission has been received!

Oops! Something went wrong while submitting the form.

Отзывы читателей

Помощь

Ответы на частые вопросы. Почта для связи — [email protected]
Как оплатить подписку?

Введите в форму выше свою почту и нажмите «Подписаться». Введите данные своей банковской карты и нажмите «Оплатить». Следуйте инструкциям системы

Не хочу доверять вам данные карты

Мы не получаем данные карты. Их знает только платёжная система. Все передаваемые данные надёжно зашифрованы

Есть ли доступ к архиву?

Да, на сайте Одайджеста, в телеграм-боте и ВК-боте вы можете получить любой выпуск рассылки из архива

Как отменить подписку?

Проще всего отменить в боте — пункт «Отмена подписки» в главном меню

Ещё можно ввести данные карты в личном кабинете CloudPayments и нажать «Отменить». Ссылка есть в каждом письме

Либо просто напишите нам свою почту и просьбу об отмене

Как вернуть деньги, если не понравилось?

Если вы подписались, но рассылка вам не подошла по любой причине, мы без вопросов вернём деньги. Напишите нам письмо в свободной форме с почты, на которую оформили подписку. Вернуть деньги можно в течение 30 дней с момента оформления подписки

У меня нет банковской карты, как подписаться?

Не беда, можно оформить виртуальную карту у ЯндексДенег или Киви. Либо напишите на почту, что-нибудь придумаем

Письма не приходят, что делать?

Проверьте папку со спамом, папку с промоакциями и другие папки в вашей почте. Если там нет, напишите на почту

Можно подписать компанию?

Да, есть корпоративная подписка со скидками. Напишите нам, мы расскажем об условиях, выставим счёт и подпишем ваших дизайнеров

Научный дайджест: сайт быстрых знакомств — залог долгой любви; «зеленые пальцы» спасают от стресса

  • Леонид Лунеев
  • Би-би-си

Среди научных новостей недели:

  • Знакомство через мобильное приложение — гарантия прочных отношений
  • «Зеленые пальцы» спасают от стресса
  • Аптека на дому: может ли 3D-принтер распечатать вам лекарство по рецепту?

Интернет-знакомство с серьезными намерениями

Автор фото, Getty Images

Подпись к фото,

У людей, которые знакомятся через телефонные приложения, часто бывают самые серьезные намерения

В 2010-е, с появлением смартфонов и мобильных приложений, резко пошла вверх популярность сайтов быстрых знакомств. В самом деле, достаточно нескольких нажатий пальцев — и электронная сводница к вашим услугам. Но вместе с удобством и популярностью пришла и критика, дескать, все эти приложения способствуют лишь случайным связям, а настоящей любви таким образом не обрести.

Джина Потарка из университета Женевы решила выяснить, в самом ли деле есть разница в качестве отношений, завязанных при обычных обстоятельствах и через приложения.

«В последние годы я слышала в СМИ столько страшилок о вреде всех этих приложений быстрых знакомств для человеческих отношений, что захотела эмпирическим путем проверить, есть ли в самом деле повод для паники», — говорит исследовательница.

Чтобы выяснить разницу между двумя типами завязывания отношений, Потарка изучила результаты опросов населения Швейцарии за 2018 год и выявила свыше 3 тыс. пар, встретившихся в последние 10 лет. Им было предложено заполнить опросники, в которых, среди прочего, предлагалось рассказать, как именно завязалось знакомство, довольны ли участники своими отношениями и собираются ли развивать их дальше.

Автор фото, Getty Images

Как выяснилось, пары, встретившиеся через мобильные приложения, ничем не отличаются от тех, кто познакомился вне интернета в том, что касается желания завести семью. Они получают такое же удовольствие от отношений и жизни в целом. Зато когда речь заходила о желании жить под одной крышей и завести детей в ближайшие три года, пользователи приложений, особенно женщины, давали фору всем остальным.

«Основной вывод моего исследования заключается в том, что отношения, начавшиеся с нажатия кнопки в мобильном телефоне, качественно ничем не отличаются от любых других, и вступившие в них люди вовсе не рассматривают их как нечто временное, а напротив, даже больше других заинтересованы в совместной жизни. Женщины в таких случаях даже скорее хотят стать матерями», — поясняет Потарка.

«Не буду отметать теорию о том, что большое число людей использует приложения для случайных связей, которые не заканчиваются официальными отношениями и поэтому не попадают в статистику, — признается автор исследования. — Но по полученным из разных источников данным о намерениях людей, пользователи таких приложений даже на стадии первых встреч куда более заинтересованы в том, чтобы завязать долгосрочные, возможно, семейные отношения, нежели те, кто такими приложениями не пользуется».

Конечно, говорит Потарка, тут есть и швейцарская специфика, где в силу культурных традиций упор делается на создание семьи, так что исследования по другим странам могли бы дать более полную картину.

«Зеленые пальцы » — здоровая голова?

Автор фото, Getty Images

В Британии есть выражение «зеленые пальцы» (green fingers): так говорят о людях, у которых в саду, огороде и даже цветочных горшках на подоконнике все цветет и колосится. Видимо, они отдают растениям частичку себя, а взамен… Вот тут-то и выясняется самое интересное. Как обнаружили исследователи из Шеффилдского университета, постоянные занятия садоводством (это когда вы по нескольку раз в неделю берете в руки грабли или секатор, а не один раз в сто лет поливаете кактус), помимо кулинарно-практической и декоративно-эстетической пользы, реально снижают уровень стресса и улучшают ваше психологическое состояние.

Авторы нового исследования говорят, что раньше все отмечали лишь пользу от физической активности при работе в саду, забывая о психологической составляющей.

Ученые провели многочисленные опросы, в ходе которых их участники по-разному объясняли, что подтолкнуло их к занятию садоводством, но больше половины заявили, что делают это исключительно для удовольствия, а четверть отметила, что это улучшает самочувствие, в том числе снижает стресс, позволяет расслабиться, а в некоторых случаях даже помогает побороть депрессию.

Автор фото, Getty Images

«Печально, что несмотря на растущие свидетельства пользы домашнего садоводства для здоровья, эта сфера не считается приоритетной у политиков и градостроителей, сетуют авторы исследования. — Садики при жилых домах становятся все меньше, а некоторы застройщики, особенно в густонаселенных городских районах, и вовсе не включают их в свои планы».

«Собственно, это может быть и не садоводство, а, скажем, рыбалка. Это вовсе не важно, главное — соблюдение правильного баланса между работой и получением удовольствия», — утверждает один из авторов нового исследования Росс Кэмерон.

Хотя исследование проводилось еще до начала пандемии коронавируса, ученые говорят, что есть много указаний на то, что вынужденное сидение дома и практически сошедшая на нет социальная жизнь заставили людей искать новые или вспоминать старые хобби, в том числе садоводство, которое оказалось неожиданным избавлением от напряжения и неудобств, вызванных локдаунами и сопутствующими ограничениями.

«Похоже, что домашнее садоводство неплохо защищает нашу психику, люди буквально выключают новости, которые навевают одни лишь неприятные мысли, и работа в саду на самом деле спасает их от негативных эмоций», — говорит Кэмерон.

Сам себе фармаколог

Автор фото, Getty Images

Сингапурские инженеры нашли биомедицинское применение трехмерным принтерам, проложив путь для новой технологии создания доступных, индивидуальных и строго дозированных лекарств на дому.

Ученые, опубликовавшие подробности своей разработки в издании International Journal of Pharmaceutics, исходили из того, что крупные фармацевтические компании, которые производят лекарства в промышленных масштабах, предлагают пациентам с разными нуждами одни и те же медикаменты. В результате люди часто вынуждены сами дозировать лекарство, что и неудобно (попробуйте разломить на четвертинки крошечную жесткую таблетку или высыпать треть порошка из запечатанной капсулы) а порой и опасно, потому что может привести к ошибке.

«У каждого человека — свои биологические циклы, поэтому каждому нужны индивидуальные лекарства», — поясняет ведущий автор разработки, доцент биомолекулярной инженерии Национального университета Сигапура Соу Сяо Лин.

В основе метода, предложенного Сяо Линем, лежит формовка пилюли. Вместо того, чтобы создавать лекарство, сингапурские инженеры предлагают печатать на трехмерном принтере оболочки разных размеров и форм, которые позволяли бы не только подбирать нужную дозу, но и с точностью выверять время и скорость выхода лекарства в организм пациента.

3D-принтеры используются в медицине уже давно: с их помощью, к примеру, успешно печатают зубные и иные протезы.

Сяо Лин и его коллеги предлагают использовать для печати своих пилюль стандартный трехмерный принтер стоимостью около 200 долларов, надежный и доступный.

Ранее он уже экспериментировал с трехмерной печатью таблеток, но пришел к выводу, что если использовать само лекарство в качестве печатного материала, оно быстро засоряет принтер. Так и возникла идея с печатью форм для пилюль.

Сначала из обычного пластика, применяемого в трехмерной печати (обычно это пластик типа ABS или PLA), создается нужная геометрическая форма.

После того, как форма изготовлена, она заполняется растворимой в воде и биоразлагаемой оболочкой будущей таблетки с заранее определенным под нужды пациента размером и формой отверстия, так что лекарство будет выпущено в нужный момент, и сам процесс его выхода из оболочки тоже будет контролируемым и настроенным в соответствии с нуждами пациента.

В каждой оболочке можно комбинировать сразу несколько лекарств, так что новая технология обещает облегчить жизнь пациентам, которые вынуждены принимать сразу несколько медикаментов, причем в разное время.

Остается только надеяться, что трехмерной печатью не заинтересуются (если уже не заинтересовались) доморощенные химики, у которых на уме вовсе не лекарственные препараты.

событий | Официальный сайт НОЧУ ВО «МЭИ»

В этом учебном году студенты факультета дизайна посетили несколько выставок:

  • 08.09.2020 — посетили Государственный музей А.С. Пушкина, в котором проходила выставка «Галерея искусства стран Европы и Америки 19-20 веков».
     
  • 24.09.2020 — побывали на экскурсии в Центре современного искусства «Винзавод» и арт-пространстве «Дизайн-усадьба».
     
  • 18.03.2021 – ходили в гости к отечественным дизайнерам в Центр Дизайна ArtPlay. В Мастерской дизайнеров ребятам рассказали, как создают продукт дизайна с нуля, от идеи до реализации, как прорабатывается идея, что значит скетчбук для дизайнера, как позиционировать и представлять себя как дизайнера, как представлять свой дизайн-продукт. Ну и обсудили с ними не романтическую сторону дизайна, маркетинг, сотрудничество с фабриками и создание своего производства. Также посетили в Центре Современного Искусства «Винзавод» две выставки: в Тотибадзе галерее, Натальи Флоренской «Мой Тбилиси», малоформатная, многоцветная живопись о ностальгических местах, значимых для художницы; в галерее Pop of Art художника из Санкт-Петербурга Владимира Шинкарёва «One more time», это живопись, художник изображает основные туристические места Санкт-Петербурга: Мойка, Фонтанка, Чёрная Речка и т.д. 
     
  • 25.03.2021 — посетили выставку «ВХУТЕМАС 100. Школа авангарда» в музее Москвы. На выставке представлены работы студентов ВХУТЕМАСа и их знаменитых преподавателей. Выставка структурирована по факультетам, она показывает, как был выстроен учебный процесс, взаимодействие студентов с фабриками, идеи взаимопроницамости жизни и творчества нового, советского человека. Студенты особенно отметили архитектуру выставки, интереснейший подход студентов ВХУТЕМАСа к оформлению работ.
  • 23.04.2021 — посетили выставку «Лаборатория Будущего. Кинетическое искусство в России» в Новой Третьякове. Выставка посвящена одному из самых значимых и загадочных направлений в истории российского искусства. Экспозиция включает около 400 произведений, показывает панораму развития кинетического искусства в 1960–1970-х годах, прослеживая его связь с экспериментами авангардистов начала века и современными художественными практиками. Кинетическое искусство основывается на идее трансформации: как художественной формы, так и самого процесса восприятия. Изменчивость, подвижность, нестабильность — определяющие качества для произведений, которые преобразовываются с помощью механических сил или визуальных эффектов. Кинетизм был во многом связан с идеей реабилитации технического прогресса и формированием информационного общества и возник одновременно во многих странах мира.
  • 29.04.2021 – посетили кураторскую экскурсию по выставкам Анны Афониной (живопись) «Это уйдёт и останется» и Лили Бабаян «Романово.
    Обитаемый остров. «музей»», где состоялась беседа кураторов со студентами на тему «Современная живопись и её трансформация».

Мероприятия:

26 сентября факультет дизайна провел конкурс Граффити. В конкурсе участвовали студенты МЭИ и Колледжа МГОК. Всем были вручены призы и сертификаты участников. Лучшим признан студент 4 курса (профиль Графический дизайн) Худайбердиев Сардор Комил.

25 декабря 2020 г. студенты Московского экономического института Сашина Алена, Степанова Лена и Орлов Саша поучаствовали в онлайн-конкурсе Новогоднего плаката-открытки.

Также в декабре 2020 г. внимаю всех желающих были представлены несколько мастер-классов. Мастер-классы провел преподаватель факультета дизайна – Голованев Михаил Николаевич, декоратор, практикующий дизайнер.

 

16.04.2021 – студенты факультета дизайна поучаствовали в конкурсе исследовательских и творческих работ «Мой город глазами современника». Гуськова Арина получила I место в творческой номинации

 

20-21. 04.2021 студенты факультета дизайна участвовали со статьями и докладами во II межвузовской студенческой научно-практической конференции «Студенческая молодежь XXI века: наука, творчество, карьера, цифровизация»

 

С 20-24 апреля 2021 года, в Ростове-на-Дону, на базе Донского государственного технического университета, состоялось центральное событие в сфере креативных индустрий на Юге страны: Форум-фестиваль архитектуры, дизайна и высоких технологий «АРТНОБЕЛЬ»

Организаторы форума-фестиваля АРТНОБЕЛЬ – 2021 пригласили заведующую кафедрой «Художественного проектирования» Дембич Наталью Дмитриевну в качестве спикера и куратора студенческих коллаборационых команд по специальностям дизайн среды, дизайн костюма и промышленный дизайн.

АРТНОБЕЛЬ – 2021 – это дискуссии, лекции, экспертные сессии, креативные мастерские, экскурсии, выставки, конкурсы, арт-хакатон по 9 направлениям и многое другое. Одной из целей мероприятия стало объединение студентов разных городов для единой командной работы.

Наталья Дмитриевна, как спикер, читала лекции и руководила командами в конкурсе «Арт объект». В одной из команд принимала участие наша студентка Варвара Валиева. Варвара ездила с Натальей Дмитриевной на фестиваль, как лучшая студентка 1 курса. Студенты команды в течении трех дней дискутировали, придумывали, рисовали, строили, красили и украшали свой объект. В итоге они представили на конкурс композицию «Волны Дона», которая получила Главный приз в номинации: «Дебют. Арт объект – перформанс». А сам арт объект «Волны Дона» послужил подиумом для проведения дефиле команды девушек направления дизайн костюма, они продемонстрировали шляпы из сена.

 

 

Дайджест — Сайт телеканала «Qostanaı»

Дайджест — Сайт телеканала «Qostanaı» Горячая тема ПРЯМЫЕ ВЫБОРЫ СЕЛЬСКИХ АКИМОВ — ЗНАКОВОЕ СОБЫТИЕ ДЛЯ ВСЕЙ СТРАНЫ Узнать больше Архив новостей
«Август 2021»
ПнВтСрЧтПтСбВс

 

 

 

 

 

 

1
23456

7

8
9101112131415
16171819202122
23242526272829
3031

 

 

 

 

 

21:33, 30 января 2020
В ИЮЛЕ КАЗАХСТАН ПОВЫСИТ МИНИМАЛЬНУЮ ЗАРАБОТНУЮ ПЛАТУ
Узнать больше 21:36, 15 января 2020
ЕЛБАСЫ ВСТРЕТИЛСЯ С НУРЛАНОМ НИГМАТУЛИНЫМ
Узнать больше 21:30, 18 декабря 2019
ВЫГОДНОЕ СТРОИТЕЛЬСТВО ОБЕИМ СТОРОНАМ
Узнать больше 21:36, 29 ноября 2019
УВЕЛИЧИТСЯ ПОДДЕРЖКА ПРЕДПРИНИМАТЕЛЕЙ
Узнать больше 21:30, 28 ноября 2019
СЕССИЯ СОВЕТА КОЛЛЕКТИВНОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ОДКБ
Узнать больше 21:43, 27 ноября 2019
ЗАКРЫТИЕ ЯДЕРНОГО ПОЛИГОНА – ДОСТИЖЕНИЕ Н.
НАЗАРБАЕВА Узнать больше 21:34, 26 ноября 2019
ВОПРОСЫ ГОСУДАРСТВЕННО-ЧАСТНОГО ПАРТНЁРСТВА
Узнать больше 21:30, 26 ноября 2019
ПРЕЗИДЕНТ ВСТРЕТИЛСЯ С ГЛАВАМИ ИНОСТРАННЫХ ДИПЛОМАТИЧЕСКИХ М…
Узнать больше 20:33, 22 ноября 2019
ЕЛБАСЫ ВСТРЕТИЛСЯ С ПРЕЗИДЕНТОМ ШВЕЙЦАРИИ
Узнать больше 21:30, 18 ноября 2019
ЕЛБАСЫ ПРИНЯЛ ЗАМЕСТИТЕЛЯ ПРЕДСЕДАТЕЛЯ АНК
Узнать больше 21:37, 15 ноября 2019
БОРЬБА С ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ПРЕСТУПНОСТЬЮ БУДЕТ УСИЛЕНА
Узнать больше 21:30, 13 ноября 2019
ЕЛБАСЫ ПРИНЯЛ РЕКТОРА КАЗАХСКОГО НАЦИОНАЛЬНОГО УНИВЕРСИТЕТА.
.. Узнать больше

Текстильлегпром 2021 — Официальный сайт организатора АО Текстильэкспо

«ВЕЛЛЕС», группа компаний 28 лет на рынке швейного оборудования.  Ассортимент компании — промышленные швейные машины, бытовые и промышленные вышивальные машины, бытовые швейные машины и оверлоки, вязальные машины, оборудование для печати по текстилю, лазерные машины, раскройные комплексы,  гладильное оборудование, иглы, нитки, аксессуары.

Официальный представитель: «KANSAI Special», Япония;  «GARUDAN», Чехия; «TOYOTA», Япония; «GBOS», Китай. Официальный дистрибьютор: «BROTHER», Япония; «LELIT», Италия; «UNICUT», Польша; «SCHULZE», Германия; «MELCO», Швейцария. Дилер: «ROLAND», Япония; «ORGAN», Япония. Владелец торговых марок «VELLES», «LEADER», «JASMINE», «LADY SEW».

Компания «ЮНСЕН» – ведущий поставщик качественных импортных материалов для верхней одежды. Ассортимент компании: курточные, подкладочные ткани, ткани для спецодежды, поларфлис, утеплители и cветовозвращающие материалы. «ЮНСЕН» – эксклюзивный поставщик брендов тканей FITSYSTEM, LOKKER и утеплителя UNSEN.

«ТМ Утренняя заря» —  компания занимается производством  и продажей домашнего текстиля. ТМ Утренняя заря» предлагает широкий ассортимент полотенец, произведенных в России, Беларуси, Украине, Армении и т.д. 

Фабрика по производству трикотажных полотен «Райтекс» . На производстве  компании установлены современные вязальные машины, которые способны вязать разные виды трикотажных полотен всевозможных ширин и фактур: кулирная гладь, интерлок, футер, пике, рибана, кашкорсе и др. из хлопчатобумажной и смесовой пряжи в нескольких разновидностях окрашивания (гладкокрашеное, набивное, реактивное), которые предназначены для пошива нижнего белья, детского и взрослого трикотажа. Окрашивание и технологические обработки полотен производят по турецкой технологии европейскими красителями. На предприятии установлены современные печатные машины для нанесения различных дизайнов на полотно.

Медиатека

Медиатека

Array
(
    [ID] => 2
    [~ID] => 2
    [TIMESTAMP_X] => 26.05.2020 15:04:23
    [~TIMESTAMP_X] => 26.05.2020 15:04:23
    [IBLOCK_TYPE_ID] => content
    [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
    [LID] => s1
    [~LID] => s1
    [CODE] => media
    [~CODE] => media
    [NAME] => Медиатека
    [~NAME] => Медиатека
    [ACTIVE] => Y
    [~ACTIVE] => Y
    [SORT] => 600
    [~SORT] => 600
    [LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
    [~LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
    [DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
    [~DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
    [SECTION_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/
    [~SECTION_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/
    [CANONICAL_PAGE_URL] => 
    [~CANONICAL_PAGE_URL] => 
    [PICTURE] => 
    [~PICTURE] => 
    [DESCRIPTION] => 
    [~DESCRIPTION] => 
    [DESCRIPTION_TYPE] => text
    [~DESCRIPTION_TYPE] => text
    [RSS_TTL] => 24
    [~RSS_TTL] => 24
    [RSS_ACTIVE] => Y
    [~RSS_ACTIVE] => Y
    [RSS_FILE_ACTIVE] => N
    [~RSS_FILE_ACTIVE] => N
    [RSS_FILE_LIMIT] => 
    [~RSS_FILE_LIMIT] => 
    [RSS_FILE_DAYS] => 
    [~RSS_FILE_DAYS] => 
    [RSS_YANDEX_ACTIVE] => N
    [~RSS_YANDEX_ACTIVE] => N
    [XML_ID] => 
    [~XML_ID] => 
    [TMP_ID] => 8f6af33ee681837bd573066c8228684b
    [~TMP_ID] => 8f6af33ee681837bd573066c8228684b
    [INDEX_ELEMENT] => Y
    [~INDEX_ELEMENT] => Y
    [INDEX_SECTION] => Y
    [~INDEX_SECTION] => Y
    [WORKFLOW] => N
    [~WORKFLOW] => N
    [BIZPROC] => N
    [~BIZPROC] => N
    [SECTION_CHOOSER] => L
    [~SECTION_CHOOSER] => L
    [LIST_MODE] => 
    [~LIST_MODE] => 
    [RIGHTS_MODE] => S
    [~RIGHTS_MODE] => S
    [SECTION_PROPERTY] => N
    [~SECTION_PROPERTY] => N
    [PROPERTY_INDEX] => N
    [~PROPERTY_INDEX] => N
    [VERSION] => 1
    [~VERSION] => 1
    [LAST_CONV_ELEMENT] => 0
    [~LAST_CONV_ELEMENT] => 0
    [SOCNET_GROUP_ID] => 
    [~SOCNET_GROUP_ID] => 
    [EDIT_FILE_BEFORE] => 
    [~EDIT_FILE_BEFORE] => 
    [EDIT_FILE_AFTER] => 
    [~EDIT_FILE_AFTER] => 
    [SECTIONS_NAME] => Разделы
    [~SECTIONS_NAME] => Разделы
    [SECTION_NAME] => Раздел
    [~SECTION_NAME] => Раздел
    [ELEMENTS_NAME] => Элементы
    [~ELEMENTS_NAME] => Элементы
    [ELEMENT_NAME] => Элемент
    [~ELEMENT_NAME] => Элемент
    [EXTERNAL_ID] => 
    [~EXTERNAL_ID] => 
    [LANG_DIR] => /
    [~LANG_DIR] => /
    [SERVER_NAME] => globalcompact. ru
    [~SERVER_NAME] => globalcompact.ru
    [USER_HAVE_ACCESS] => 1
    [SECTION] => Array
        (
            [PATH] => Array
                (
                    [0] => Array
                        (
                            [ID] => 26
                            [~ID] => 26
                            [TIMESTAMP_X] => 2018-05-10 16:05:10
                            [~TIMESTAMP_X] => 2018-05-10 16:05:10
                            [MODIFIED_BY] => 1
                            [~MODIFIED_BY] => 1
                            [DATE_CREATE] => 2018-05-10 16:05:10
                            [~DATE_CREATE] => 2018-05-10 16:05:10
                            [CREATED_BY] => 1
                            [~CREATED_BY] => 1
                            [IBLOCK_ID] => 2
                            [~IBLOCK_ID] => 2
                            [IBLOCK_SECTION_ID] => 
                            [~IBLOCK_SECTION_ID] => 
                            [ACTIVE] => Y
                            [~ACTIVE] => Y
                            [GLOBAL_ACTIVE] => Y
                            [~GLOBAL_ACTIVE] => Y
                            [SORT] => 500
                            [~SORT] => 500
                            [NAME] => Дайджест
                            [~NAME] => Дайджест
                            [PICTURE] => 
                            [~PICTURE] => 
                            [LEFT_MARGIN] => 27
                            [~LEFT_MARGIN] => 27
                            [RIGHT_MARGIN] => 28
                            [~RIGHT_MARGIN] => 28
                            [DEPTH_LEVEL] => 1
                            [~DEPTH_LEVEL] => 1
                            [DESCRIPTION] => 
                            [~DESCRIPTION] => 
                            [DESCRIPTION_TYPE] => text
                            [~DESCRIPTION_TYPE] => text
                            [SEARCHABLE_CONTENT] => ДАЙДЖЕСТ

                            [~SEARCHABLE_CONTENT] => ДАЙДЖЕСТ

                            [CODE] => digest
                            [~CODE] => digest
                            [XML_ID] => 
                            [~XML_ID] => 
                            [TMP_ID] => 
                            [~TMP_ID] => 
                            [DETAIL_PICTURE] => 
                            [~DETAIL_PICTURE] => 
                            [SOCNET_GROUP_ID] => 
                            [~SOCNET_GROUP_ID] => 
                            [LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                            [~LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                            [SECTION_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?SECTION_ID=26
                            [~SECTION_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?SECTION_ID=26
                            [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [IBLOCK_CODE] => media
                            [~IBLOCK_CODE] => media
                            [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [~IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [EXTERNAL_ID] => 
                            [~EXTERNAL_ID] => 
                            [IPROPERTY_VALUES] => Array
                                (
                                )

                        )

                )

        )

    [IPROPERTY_VALUES] => Array
        (
        )

    [ITEMS] => Array
        (
            [0] => Array
                (
                    [ID] => 1431
                    [~ID] => 1431
                    [IBLOCK_ID] => 2
                    [~IBLOCK_ID] => 2
                    [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [~IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [NAME] => GC NETWORK RUSSIA.  IMPACT STYLE MAILING № 1/2021
                    [~NAME] => GC NETWORK RUSSIA. IMPACT STYLE MAILING № 1/2021
                    [ACTIVE_FROM] => 21.04.2021
                    [~ACTIVE_FROM] => 21.04.2021
                    [TIMESTAMP_X] => 21.04.2021 14:22:57
                    [~TIMESTAMP_X] => 21.04.2021 14:22:57
                    [DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=1431
                    [~DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=1431
                    [LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [~LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [DETAIL_TEXT] => 
                    [~DETAIL_TEXT] => 
                    [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [~DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_TEXT] => 
                    [~PREVIEW_TEXT] => 
                    [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [~PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_PICTURE] => 
                    [~PREVIEW_PICTURE] => 
                    [LANG_DIR] => /
                    [~LANG_DIR] => /
                    [SORT] => 500
                    [~SORT] => 500
                    [CODE] => gc-network-russia-impact-style-mailing-1-2021
                    [~CODE] => gc-network-russia-impact-style-mailing-1-2021
                    [EXTERNAL_ID] => 1431
                    [~EXTERNAL_ID] => 1431
                    [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [IBLOCK_CODE] => media
                    [~IBLOCK_CODE] => media
                    [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [~IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [LID] => s1
                    [~LID] => s1
                    [EDIT_LINK] => 
                    [DELETE_LINK] => 
                    [DISPLAY_ACTIVE_FROM] => 21. 04.2021
                    [IPROPERTY_VALUES] => Array
                        (
                        )

                    [FIELDS] => Array
                        (
                        )

                    [PROPERTIES] => Array
                        (
                            [HOT] => Array
                                (
                                    [ID] => 4
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Высокий приоритет
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 10
                                    [CODE] => HOT
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => L
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => C
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [VALUE_ENUM_ID] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Высокий приоритет
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 4331
                                    [VALUE] => 2486
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 2486
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [EXPERTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 20
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Эксперты
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 30
                                    [CODE] => EXPERTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => E
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 1
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 7
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Эксперты
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [VIDEO] => Array
                                (
                                    [ID] => 21
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Ссылка на видео
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 40
                                    [CODE] => VIDEO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => S
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Ссылка на видео
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [PHOTO] => Array
                                (
                                    [ID] => 34
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-05-16 18:03:06
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Фото
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 50
                                    [CODE] => PHOTO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => jpg, gif, bmp, png, jpeg
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Фото
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                        )

                    [DISPLAY_PROPERTIES] => Array
                        (
                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 4331
                                    [VALUE] => 2486
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 2486
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                    [DISPLAY_VALUE] => Загрузить
                                    [FILE_VALUE] => Array
                                        (
                                            [ID] => 2486
                                            [TIMESTAMP_X] => 21. 04.2021 14:22:57
                                            [MODULE_ID] => iblock
                                            [HEIGHT] => 0
                                            [WIDTH] => 0
                                            [FILE_SIZE] => 292558
                                            [CONTENT_TYPE] => application/pdf
                                            [SUBDIR] => iblock/da3
                                            [FILE_NAME] => GC-Network-Russia_IS-MAILNG-_1_2021.pdf
                                            [ORIGINAL_NAME] => GC Network Russia_IS MAILNG №1_2021.pdf
                                            [DESCRIPTION] => 
                                            [HANDLER_ID] => 
                                            [EXTERNAL_ID] => 8a18696257e54ab55d6dc7d036579932
                                            [~src] => 
                                            [SRC] => /upload/iblock/da3/GC-Network-Russia_IS-MAILNG-_1_2021. pdf
                                        )

                                )

                        )

                )

            [1] => Array
                (
                    [ID] => 1285
                    [~ID] => 1285
                    [IBLOCK_ID] => 2
                    [~IBLOCK_ID] => 2
                    [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [~IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [NAME] => UN Global Compact Russian Digest № 3, 2019
                    [~NAME] => UN Global Compact Russian Digest № 3, 2019
                    [ACTIVE_FROM] => 11.12.2019 15:46:25
                    [~ACTIVE_FROM] => 11.12.2019 15:46:25
                    [TIMESTAMP_X] => 11.12.2019 15:47:59
                    [~TIMESTAMP_X] => 11.12.2019 15:47:59
                    [DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=1285
                    [~DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=1285
                    [LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [~LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [DETAIL_TEXT] => 
                    [~DETAIL_TEXT] => 
                    [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [~DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_TEXT] => 
                    [~PREVIEW_TEXT] => 
                    [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [~PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_PICTURE] => 
                    [~PREVIEW_PICTURE] => 
                    [LANG_DIR] => /
                    [~LANG_DIR] => /
                    [SORT] => 500
                    [~SORT] => 500
                    [CODE] => un-global-compact-russian-digest-3-2019
                    [~CODE] => un-global-compact-russian-digest-3-2019
                    [EXTERNAL_ID] => 1285
                    [~EXTERNAL_ID] => 1285
                    [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [IBLOCK_CODE] => media
                    [~IBLOCK_CODE] => media
                    [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [~IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [LID] => s1
                    [~LID] => s1
                    [EDIT_LINK] => 
                    [DELETE_LINK] => 
                    [DISPLAY_ACTIVE_FROM] => 11. 12.2019
                    [IPROPERTY_VALUES] => Array
                        (
                        )

                    [FIELDS] => Array
                        (
                        )

                    [PROPERTIES] => Array
                        (
                            [HOT] => Array
                                (
                                    [ID] => 4
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Высокий приоритет
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 10
                                    [CODE] => HOT
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => L
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => C
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [VALUE_ENUM_ID] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Высокий приоритет
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 3874
                                    [VALUE] => 2194
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 2194
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [EXPERTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 20
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Эксперты
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 30
                                    [CODE] => EXPERTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => E
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 1
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 7
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Эксперты
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [VIDEO] => Array
                                (
                                    [ID] => 21
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Ссылка на видео
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 40
                                    [CODE] => VIDEO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => S
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Ссылка на видео
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [PHOTO] => Array
                                (
                                    [ID] => 34
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-05-16 18:03:06
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Фото
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 50
                                    [CODE] => PHOTO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => jpg, gif, bmp, png, jpeg
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Фото
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                        )

                    [DISPLAY_PROPERTIES] => Array
                        (
                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 3874
                                    [VALUE] => 2194
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 2194
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                    [DISPLAY_VALUE] => Загрузить
                                    [FILE_VALUE] => Array
                                        (
                                            [ID] => 2194
                                            [TIMESTAMP_X] => 11. 12.2019 15:47:59
                                            [MODULE_ID] => iblock
                                            [HEIGHT] => 0
                                            [WIDTH] => 0
                                            [FILE_SIZE] => 31424374
                                            [CONTENT_TYPE] => application/pdf
                                            [SUBDIR] => iblock/c61
                                            [FILE_NAME] => UN-Global-Compact-Russian-Diges-_3_-2019.pdf
                                            [ORIGINAL_NAME] => UN Global Compact Russian Diges №3, 2019.pdf
                                            [DESCRIPTION] => 
                                            [HANDLER_ID] => 
                                            [EXTERNAL_ID] => 4c496c121d15580158b80442d0e42f20
                                            [~src] => 
                                            [SRC] => /upload/iblock/c61/UN-Global-Compact-Russian-Diges-_3_-2019. pdf
                                        )

                                )

                        )

                )

            [2] => Array
                (
                    [ID] => 979
                    [~ID] => 979
                    [IBLOCK_ID] => 2
                    [~IBLOCK_ID] => 2
                    [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [~IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [NAME] => UN Global Compact Russian Digest №2, 2018
                    [~NAME] => UN Global Compact Russian Digest №2, 2018
                    [ACTIVE_FROM] => 19.09.2018 20:17:38
                    [~ACTIVE_FROM] => 19.09.2018 20:17:38
                    [TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:19
                    [~TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:19
                    [DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=979
                    [~DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=979
                    [LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [~LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [DETAIL_TEXT] => 
                    [~DETAIL_TEXT] => 
                    [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [~DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_TEXT] => 
                    [~PREVIEW_TEXT] => 
                    [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [~PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_PICTURE] => 
                    [~PREVIEW_PICTURE] => 
                    [LANG_DIR] => /
                    [~LANG_DIR] => /
                    [SORT] => 500
                    [~SORT] => 500
                    [CODE] => un-global-compact-digest-2-2018
                    [~CODE] => un-global-compact-digest-2-2018
                    [EXTERNAL_ID] => 979
                    [~EXTERNAL_ID] => 979
                    [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [IBLOCK_CODE] => media
                    [~IBLOCK_CODE] => media
                    [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [~IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [LID] => s1
                    [~LID] => s1
                    [EDIT_LINK] => 
                    [DELETE_LINK] => 
                    [DISPLAY_ACTIVE_FROM] => 19. 09.2018
                    [IPROPERTY_VALUES] => Array
                        (
                        )

                    [FIELDS] => Array
                        (
                        )

                    [PROPERTIES] => Array
                        (
                            [HOT] => Array
                                (
                                    [ID] => 4
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Высокий приоритет
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 10
                                    [CODE] => HOT
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => L
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => C
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [VALUE_ENUM_ID] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Высокий приоритет
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 2033
                                    [VALUE] => 1422
                                    [DESCRIPTION] => UN Global Compact Digest №2, 2018
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 1422
                                    [~DESCRIPTION] => UN Global Compact Digest №2, 2018
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [EXPERTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 20
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Эксперты
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 30
                                    [CODE] => EXPERTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => E
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 1
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 7
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Эксперты
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [VIDEO] => Array
                                (
                                    [ID] => 21
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Ссылка на видео
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 40
                                    [CODE] => VIDEO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => S
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Ссылка на видео
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [PHOTO] => Array
                                (
                                    [ID] => 34
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-05-16 18:03:06
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Фото
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 50
                                    [CODE] => PHOTO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => jpg, gif, bmp, png, jpeg
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Фото
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                        )

                    [DISPLAY_PROPERTIES] => Array
                        (
                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 2033
                                    [VALUE] => 1422
                                    [DESCRIPTION] => UN Global Compact Digest №2, 2018
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 1422
                                    [~DESCRIPTION] => UN Global Compact Digest №2, 2018
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                    [DISPLAY_VALUE] => Загрузить
                                    [FILE_VALUE] => Array
                                        (
                                            [ID] => 1422
                                            [TIMESTAMP_X] => 19. 09.2018 20:19:19
                                            [MODULE_ID] => iblock
                                            [HEIGHT] => 0
                                            [WIDTH] => 0
                                            [FILE_SIZE] => 18225359
                                            [CONTENT_TYPE] => application/pdf
                                            [SUBDIR] => iblock/d41
                                            [FILE_NAME] => UN-Global-Compact-Digest-_2_-2018.pdf
                                            [ORIGINAL_NAME] => UN Global Compact Digest №2, 2018.pdf
                                            [DESCRIPTION] => UN Global Compact Digest №2, 2018
                                            [HANDLER_ID] => 
                                            [EXTERNAL_ID] => dcaf6aa471ec5874bbc4adecb3e7d814
                                            [~src] => 
                                            [SRC] => /upload/iblock/d41/UN-Global-Compact-Digest-_2_-2018. pdf
                                        )

                                )

                        )

                )

            [3] => Array
                (
                    [ID] => 546
                    [~ID] => 546
                    [IBLOCK_ID] => 2
                    [~IBLOCK_ID] => 2
                    [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [~IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                    [NAME] => UN Global Compact Russian Digest №1, 2017
                    [~NAME] => UN Global Compact Russian Digest №1, 2017
                    [ACTIVE_FROM] => 31.05.2018 18:08:25
                    [~ACTIVE_FROM] => 31.05.2018 18:08:25
                    [TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:05
                    [~TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:05
                    [DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=546
                    [~DETAIL_PAGE_URL] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=546
                    [LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [~LIST_PAGE_URL] => /mediateka/digest/
                    [DETAIL_TEXT] => 
                    [~DETAIL_TEXT] => 
                    [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [~DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_TEXT] => 
                    [~PREVIEW_TEXT] => 
                    [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [~PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                    [PREVIEW_PICTURE] => 
                    [~PREVIEW_PICTURE] => 
                    [LANG_DIR] => /
                    [~LANG_DIR] => /
                    [SORT] => 10
                    [~SORT] => 10
                    [CODE] => un-global-compact-russian-digest-un-global-compact-russian-digest
                    [~CODE] => un-global-compact-russian-digest-un-global-compact-russian-digest
                    [EXTERNAL_ID] => 546
                    [~EXTERNAL_ID] => 546
                    [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [~IBLOCK_TYPE_ID] => content
                    [IBLOCK_CODE] => media
                    [~IBLOCK_CODE] => media
                    [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [~IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [LID] => s1
                    [~LID] => s1
                    [EDIT_LINK] => 
                    [DELETE_LINK] => 
                    [DISPLAY_ACTIVE_FROM] => 31. 05.2018
                    [IPROPERTY_VALUES] => Array
                        (
                        )

                    [FIELDS] => Array
                        (
                        )

                    [PROPERTIES] => Array
                        (
                            [HOT] => Array
                                (
                                    [ID] => 4
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Высокий приоритет
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 10
                                    [CODE] => HOT
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => L
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => C
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [VALUE_ENUM_ID] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Высокий приоритет
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 969
                                    [VALUE] => 729
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 729
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [EXPERTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 20
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Эксперты
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 30
                                    [CODE] => EXPERTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => E
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 1
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 7
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Эксперты
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [VIDEO] => Array
                                (
                                    [ID] => 21
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Ссылка на видео
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 40
                                    [CODE] => VIDEO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => S
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => 
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => N
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Ссылка на видео
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                            [PHOTO] => Array
                                (
                                    [ID] => 34
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-05-16 18:03:06
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Фото
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 50
                                    [CODE] => PHOTO
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => Y
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => jpg, gif, bmp, png, jpeg
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => N
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 
                                    [VALUE] => 
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Фото
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                )

                        )

                    [DISPLAY_PROPERTIES] => Array
                        (
                            [DOCUMENTS] => Array
                                (
                                    [ID] => 8
                                    [TIMESTAMP_X] => 2018-04-20 12:38:11
                                    [IBLOCK_ID] => 2
                                    [NAME] => Материалы
                                    [ACTIVE] => Y
                                    [SORT] => 20
                                    [CODE] => DOCUMENTS
                                    [DEFAULT_VALUE] => 
                                    [PROPERTY_TYPE] => F
                                    [ROW_COUNT] => 1
                                    [COL_COUNT] => 30
                                    [LIST_TYPE] => L
                                    [MULTIPLE] => N
                                    [XML_ID] => 
                                    [FILE_TYPE] => pdf, doc, docx, ppt, pptx, xls, xlsx
                                    [MULTIPLE_CNT] => 5
                                    [TMP_ID] => 
                                    [LINK_IBLOCK_ID] => 0
                                    [WITH_DESCRIPTION] => Y
                                    [SEARCHABLE] => Y
                                    [FILTRABLE] => N
                                    [IS_REQUIRED] => N
                                    [VERSION] => 1
                                    [USER_TYPE] => 
                                    [USER_TYPE_SETTINGS] => 
                                    [HINT] => 
                                    [PROPERTY_VALUE_ID] => 969
                                    [VALUE] => 729
                                    [DESCRIPTION] => 
                                    [VALUE_ENUM] => 
                                    [VALUE_XML_ID] => 
                                    [VALUE_SORT] => 
                                    [~VALUE] => 729
                                    [~DESCRIPTION] => 
                                    [~NAME] => Материалы
                                    [~DEFAULT_VALUE] => 
                                    [DISPLAY_VALUE] => Загрузить
                                    [FILE_VALUE] => Array
                                        (
                                            [ID] => 729
                                            [TIMESTAMP_X] => 19. 09.2018 20:19:05
                                            [MODULE_ID] => iblock
                                            [HEIGHT] => 0
                                            [WIDTH] => 0
                                            [FILE_SIZE] => 17449062
                                            [CONTENT_TYPE] => application/pdf
                                            [SUBDIR] => iblock/779
                                            [FILE_NAME] => UN-Global-Compact_Web_Sm_new.pdf
                                            [ORIGINAL_NAME] => UN Global Compact_Web_Sm_new.pdf
                                            [DESCRIPTION] => 
                                            [HANDLER_ID] => 
                                            [EXTERNAL_ID] => 3878047bb5c737b92e59ffd71acc2628
                                            [~src] => 
                                            [SRC] => /upload/iblock/779/UN-Global-Compact_Web_Sm_new. pdf
                                        )

                                )

                        )

                )

        )

    [ELEMENTS] => Array
        (
            [0] => 1431
            [1] => 1285
            [2] => 979
            [3] => 546
        )

    [NAV_STRING] => 
    [NAV_CACHED_DATA] => 
    [NAV_RESULT] => CIBlockResult Object
        (
            [arIBlockMultProps] => Array
                (
                )

            [arIBlockConvProps] => Array
                (
                )

            [arIBlockAllProps] => Array
                (
                )

            [arIBlockNumProps] => Array
                (
                )

            [arIBlockLongProps] => Array
                (
                )

            [nInitialSize] => 
            [table_id] => 
            [strDetailUrl] => /mediateka/digest/?ELEMENT_ID=#ELEMENT_ID#
            [strSectionUrl] => 
            [strListUrl] => /mediateka/digest/
            [arSectionContext] => 
            [bIBlockSection] => 
            [nameTemplate] => 
            [_LAST_IBLOCK_ID] => 2
            [_FILTER_IBLOCK_ID] => Array
                (
                    [2] => 1
                )

            [result] => mysqli_result Object
                (
                    [current_field] => 0
                    [field_count] => 21
                    [lengths] => 
                    [num_rows] => 4
                    [type] => 0
                )

            [arResult] => Array
                (
                    [0] => Array
                        (
                            [ID] => 1431
                            [IBLOCK_ID] => 2
                            [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                            [NAME] => GC NETWORK RUSSIA.  IMPACT STYLE MAILING № 1/2021
                            [ACTIVE_FROM] => 21.04.2021
                            [TIMESTAMP_X] => 21.04.2021 14:22:57
                            [DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
                            [LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
                            [DETAIL_TEXT] => 
                            [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_TEXT] => 
                            [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_PICTURE] => 
                            [LANG_DIR] => /
                            [SORT] => 500
                            [CODE] => gc-network-russia-impact-style-mailing-1-2021
                            [EXTERNAL_ID] => 1431
                            [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [IBLOCK_CODE] => media
                            [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [LID] => s1
                        )

                    [1] => Array
                        (
                            [ID] => 1285
                            [IBLOCK_ID] => 2
                            [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                            [NAME] => UN Global Compact Russian Digest № 3, 2019
                            [ACTIVE_FROM] => 11. 12.2019 15:46:25
                            [TIMESTAMP_X] => 11.12.2019 15:47:59
                            [DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
                            [LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
                            [DETAIL_TEXT] => 
                            [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_TEXT] => 
                            [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_PICTURE] => 
                            [LANG_DIR] => /
                            [SORT] => 500
                            [CODE] => un-global-compact-russian-digest-3-2019
                            [EXTERNAL_ID] => 1285
                            [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [IBLOCK_CODE] => media
                            [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [LID] => s1
                        )

                    [2] => Array
                        (
                            [ID] => 979
                            [IBLOCK_ID] => 2
                            [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                            [NAME] => UN Global Compact Russian Digest №2, 2018
                            [ACTIVE_FROM] => 19. 09.2018 20:17:38
                            [TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:19
                            [DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
                            [LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
                            [DETAIL_TEXT] => 
                            [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_TEXT] => 
                            [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_PICTURE] => 
                            [LANG_DIR] => /
                            [SORT] => 500
                            [CODE] => un-global-compact-digest-2-2018
                            [EXTERNAL_ID] => 979
                            [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [IBLOCK_CODE] => media
                            [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [LID] => s1
                        )

                    [3] => Array
                        (
                            [ID] => 546
                            [IBLOCK_ID] => 2
                            [IBLOCK_SECTION_ID] => 26
                            [NAME] => UN Global Compact Russian Digest №1, 2017
                            [ACTIVE_FROM] => 31. 05.2018 18:08:25
                            [TIMESTAMP_X] => 19.09.2018 20:19:05
                            [DETAIL_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/#SECTION_CODE_PATH#/#ELEMENT_CODE#/
                            [LIST_PAGE_URL] => #SITE_DIR#/mediateka/
                            [DETAIL_TEXT] => 
                            [DETAIL_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_TEXT] => 
                            [PREVIEW_TEXT_TYPE] => text
                            [PREVIEW_PICTURE] => 
                            [LANG_DIR] => /
                            [SORT] => 10
                            [CODE] => un-global-compact-russian-digest-un-global-compact-russian-digest
                            [EXTERNAL_ID] => 546
                            [IBLOCK_TYPE_ID] => content
                            [IBLOCK_CODE] => media
                            [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                            [LID] => s1
                        )

                )

            [arReplacedAliases] => 
            [arResultAdd] => 
            [bNavStart] => 1
            [bShowAll] => 
            [NavNum] => 1
            [NavPageCount] => 1
            [NavPageNomer] => 1
            [NavPageSize] => 4
            [NavShowAll] => 
            [NavRecordCount] => 4
            [bFirstPrintNav] => 1
            [PAGEN] => 1
            [SIZEN] => 4
            [SESS_SIZEN] => 
            [SESS_ALL] => 
            [SESS_PAGEN] => 
            [add_anchor] => 
            [bPostNavigation] => 
            [bFromArray] => 
            [bFromLimited] => 1
            [sSessInitAdd] => 
            [nPageWindow] => 5
            [nSelectedCount] => 4
            [arGetNextCache] => Array
                (
                    [ID] => 
                    [IBLOCK_ID] => 
                    [IBLOCK_SECTION_ID] => 
                    [NAME] => 
                    [ACTIVE_FROM] => 
                    [TIMESTAMP_X] => 
                    [DETAIL_PAGE_URL] => 
                    [LIST_PAGE_URL] => 
                    [DETAIL_TEXT] => 1
                    [DETAIL_TEXT_TYPE] => 
                    [PREVIEW_TEXT] => 1
                    [PREVIEW_TEXT_TYPE] => 
                    [PREVIEW_PICTURE] => 
                    [LANG_DIR] => 
                    [SORT] => 
                    [CODE] => 
                    [EXTERNAL_ID] => 
                    [IBLOCK_TYPE_ID] => 
                    [IBLOCK_CODE] => 
                    [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => 
                    [LID] => 
                )

            [bDescPageNumbering] => 
            [arUserFields] => 
            [usedUserFields] => 
            [SqlTraceIndex] => 
            [DB] => CDatabase Object
                (
                    [db_Conn] => mysqli Object
                        (
                            [affected_rows] => 5
                            [client_info] => mysqlnd 5. 0.12-dev - 20150407 - $Id: b5c5906d452ec590732a93b051f3827e02749b83 $
                            [client_version] => 50012
                            [connect_errno] => 0
                            [connect_error] => 
                            [errno] => 0
                            [error] => 
                            [error_list] => Array
                                (
                                )

                            [field_count] => 14
                            [host_info] => Localhost via UNIX socket
                            [info] => 
                            [insert_id] => 0
                            [server_info] => 5.6.41-84.1
                            [server_version] => 50641
                            [stat] => Uptime: 15637188  Threads: 35  Questions: 50823518104  Slow queries: 78966  Opens: 1500127387  Flush tables: 1  Open tables: 127680  Queries per second avg: 3250.169
                            [sqlstate] => 00000
                            [protocol_version] => 10
                            [thread_id] => 552892112
                            [warning_count] => 0
                        )

                    [version] => 
                    [escL] => `
                    [escR] => `
                    [alias_length] => 256
                    [DBName] => glob743742_s6
                    [DBHost] => localhost
                    [DBLogin] => glob743742_u6
                    [DBPassword] => xEArN30qeoz8lP
                    [bConnected] => 1
                    [debug] => 
                    [DebugToFile] => 
                    [ShowSqlStat] => 
                    [db_Error] => 
                    [db_ErrorSQL] => 
                    [result] => 
                    [type] => MYSQL
                    [column_cache] => Array
                        (
                        )

                    [bModuleConnection] => 
                    [bNodeConnection] => 
                    [node_id] => 
                    [obSlave] => 
                    [cntQuery] => 0
                    [timeQuery] => 0
                    [arQueryDebug] => Array
                        (
                        )

                    [sqlTracker] => 
                )

            [NavRecordCountChangeDisable] => 
            [is_filtered] => 
            [nStartPage] => 1
            [nEndPage] => 1
            [resultObject] => 
        )

    [NAV_PARAM] => Array
        (
        )

)

Дайджест авторов LOST ARK — LOST ARK — официальный сайт Action-MMORPG

Искатели!

Авторы LOST ARK продолжают покорять мир Акрасии и делятся с вами самыми актуальными руководствами и опытом игры за новый класс — Охотница на демонов. Подписывайтесь на ребят и оставляйте свои комментарии. Приятного просмотра!

SINdeiru демонстрирует захватывающие бои на арене за Клинок смерти.

Nimiho рассказывает про новый режим «Хребет Игхарама».

Darkpups Ru делятся руководством на первую фазу боя с Владыкой Фетрании — Белакис.

Летсплей Oops Play с прохождением подземелья Нобельгейт.

Захватывающие бои и приятное общение на трансляциях наших авторов.

  • RockerInvoker 31 июля в 21:00 мск проведет стрим с покорением Волдана на героическом уровне сложности играя за Охотницу на демонов.
  • LORDDI регулярно проводит трансляции PvP-боев.
  • NeedyJam ежедневно стримит прохождение различных внутриигровых активностей. 
  • d_a_n_a_t_i_k 29 июля в 16:00 мск приглашает на эфир, в котором он планирует одолеть Волдана.
  • darkpups_ru не только делятся свежими руководствами, но и приглашают всех на трансляции, которые будут проходить по вечерам ближайшие три дня.
  • azu1 покоряет арену за Охотницу на демонов, показывая рейтинговые и обычные бои.
  • felikbor продолжает осваивать обновление, ну и конечно же не забывает про любимое PvP. Приходите на стрим поддержать автора.
  • lyalechka 29 июля в 17:00 мск приглашает всех понаблюдать за сражением с Волданом.
  • rorym3rcury 29 июля в 19:00 мск отправляется в бой с Волданом, заглядывайте и поддерживайте!

Если вы тоже хотите попасть в этот дайджест, присоединяйтесь к программе поддержки авторов LOST ARK!

Обсудить «ВКонтакте»
Обсудить в Discord
Подписаться на YouTube
Подписаться на Instagram

Скрининг рестрикционного переваривания облегчает эффективное обнаружение сайт-направленных мутаций, введенных CRISPR в C. albicans UME6

, 1 , 1 , 1 , 1 , 2 , 1 и 1

Бен А. Эванс

1 Департамент биологии, Государственный университет Болла, Манси, Индиана, Соединенные Штаты Америки

Оливия Л. Смит

1 Департамент биологии, Государственный университет Болла, Манси, Индиана, Соединенные Штаты Америки

Итан С.

Пикерилл

1 Биологический факультет Государственного университета Болла, Манси, штат Индиана, Соединенные Штаты Америки

Мэри К. Йорк

1 Биологический факультет Университета Болла, Манси, Индиана, Соединенные Штаты Америки

Kristen JP Buenconsejo

2 Департамент микробиологии и иммунологии, Университет Дрекселя, Филадельфия, Пенсильвания, Соединенные Штаты Америки

Антонио Э. Чемберс

1 Департамент биологии, Государственный университет Болла, Манси, Индиана, США Штаты Америки

Дуглас А.Бернштейн

1 Департамент биологии, Государственный университет Болла, Манси, Индиана, Соединенные Штаты Америки

Академический редактор: Беттина Бёттчер

1 Отделение биологии, Государственный университет Болла, Манси, Индиана, Соединенные Штаты Америки

2 Кафедра микробиологии и иммунологии, Университет Дрекселя, Филадельфия, Пенсильвания, Соединенные Штаты Америки

Автор, ответственный за переписку.

Поступило 13.04.2018 г .; Принята в печать 17 мая 2018 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение, воспроизведение и адаптацию на любом носителе и для любых целей при условии, что это правильно указано. Для указания авторства необходимо указать автора (авторов), название, источник публикации (PeerJ) и либо DOI, либо URL-адрес статьи. Эта статья цитируется другими статьями в PMC.

Abstract

Введение точечных мутаций в интересующий ген является мощным инструментом при определении функции белка.Редактирование генома с помощью CRISPR позволяет более эффективно переносить желаемую мутацию в широкий спектр модельных организмов. Традиционно для определения того, содержат ли изоляты предполагаемую мутацию, используется ПЦР-амплификация и секвенирование ДНК. Однако эффективность мутаций сильно варьируется, что может сделать секвенирование дорогостоящим и трудоемким. Для более эффективного скрининга правильных трансформантов мы идентифицировали сайты рестрикционных ферментов, которые кодируют две идентичные аминокислоты или один или два стоп-кодона.Мы использовали CRISPR для введения этих сайтов рестрикции непосредственно перед Candida albicans UME6 Zn 2+ -связывающим доменом, известным регулятором филаментации C. albicans . Хотя шаблоны репарации, кодирующие разные сайты рестрикции, не были одинаково успешными при введении мутаций, скрининг рестрикционного переваривания позволил нам быстро идентифицировать изоляты с предполагаемой мутацией экономичным способом. Кроме того, мутировавшие изоляты имеют явные дефекты филаментации и вирулентности по сравнению с диким типом C.Альбиканс . Наши данные показывают, что скрининг рестрикционного переваривания эффективно выявляет точечные мутации, введенные CRISPR, и оптимизирует процесс идентификации остатков, важных для интересующего фенотипа.

Ключевые слова: C. albicans , сайт-направленный мутагенез, рестрикционное переваривание, CRISPR, филаментация

Предпосылки

Сайт-направленный мутагенез может использоваться для введения мутации, которая приводит к изменению аминокислотной последовательности белка ( Шортл, ДиМайо и Натанс, 1981).Затем исследователи могут оценить роль измененных остатков в конкретных фенотипах. Сайт-направленный мутагенез был использован для идентификации и характеристики активных сайтов ферментов, оценки роли модификации аминокислот в функции белка и характеристики широкого спектра дополнительных свойств белка (Winter et al., 1982).

Аланин-сканирующий мутагенез, при котором конкретная аминокислота (аминокислоты) заменяется на аланин, является особенно популярным применением этого метода (Cunningham & Wells, 1989; Weiss et al., 2000). Боковая цепь метила аланина мала и неполярна. Доброкачественная природа боковой цепи аланина часто сводит на нет функциональность исходного остатка, минимально нарушая структуру основной цепи белка. Аналогичным образом можно получить дополнительные варианты белка. Например, во многих случаях карбоксильная боковая цепь остатка глутамата биохимически имитирует фосфат. Таким образом, мутация треонина или серина в глутамат имитирует конститутивное фосфорилирование (Szewczuk, Tarrant & Cole, 2009; Thorsness & Koshland, 1987).Если исследователь предполагает, что ароматический или положительно заряженный остаток взаимодействует с нуклеиновой кислотой, можно ввести отрицательно заряженный или небольшой гидрофобный остаток, чтобы проверить, важен ли указанный остаток для связывания нуклеиновой кислоты (Bernstein & Keck, 2005). Более того, стоп-кодоны могут быть введены в открытую рамку считывания для создания C-концевого усечения, а стоп-кодон, введенный в начало открытой рамки считывания, завершит трансляцию до того, как будет создан функциональный белок, создавая фенотип нулевого белка.Более того, инициация транскрипции (Vo Ngoc et al., 2017) и сплайсинг (Bortfeldt et al., 2008) частично контролируются короткими нуклеотидными последовательностями, которые можно легко исследовать с помощью сайт-направленного мутагенеза. Таким образом, сайт-направленный мутагенез является мощным инструментом для выяснения не только функции белков, но и функций последовательностей ДНК и РНК.

Исторически сайт-направленный мутагенез был многоступенчатым процессом. Например, у дрожжей клетки трансформируются экзогенной ДНК, содержащей мутацию, а гомологичная рекомбинация включает мутантную последовательность в геном.Альтернативно мутации можно субклонировать в плазмиды и трансформировать в дрожжи, лишенные интересующего гена (Cormack & Castano, 2002). Эти методы требуют, чтобы клетки выполняли гомологичную рекомбинацию с относительно высокой скоростью или поддерживали плазмиды. Кроме того, обнаружение однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) между аллелями в диплоиде является сложной задачей. Включение сайтов разрезания рестрикционным ферментом с помощью ПЦР было использовано для обнаружения SNP с использованием анализа производных расщепленных амплифицированных полиморфных последовательностей (Hodgens, Nimchuk & Kieber, 2017; Neff et al., 1998).

Одним из организмов, которые сложно модифицировать с помощью сайт-направленного мутагенеза, является грибковый патоген человека Candida albicans. Поскольку C. albicans является диплоидным, введение гомозиготного точечного мутанта исторически требовало нескольких раундов трансформации и гомологичной рекомбинации (Jones et al., 2004; Muzzey et al., 2013). Более того, плазмиды не поддерживаются постоянно в C. albicans . Однако разработка CRISPR-системы Candida сделала введение мутаций в геном более эффективным (Vyas, Barrasa & Fink, 2015; Vyas et al., 2018). Во время редактирования генома, опосредованного CRISPR, нуклеаза Cas9, связанная с направляющей молекулой РНК, нацелена на конкретную геномную последовательность, которая должна быть изменена с использованием спаривания оснований. После связывания с комплементарной последовательностью Cas9 вводит двухцепочечный разрыв. Чтобы ввести желаемую мутацию и восстановить двухцепочечный разрыв путем гомологичной рекомбинации, матрица репарации двухцепочечной ДНК, имеющая измененную последовательность, котрансформируется (обзор у Dominguez, Lim & Qi, 2016; Wang, La Russa & Qi, 2016).Клоны секвенируют, чтобы определить, была ли введена желаемая мутация, но эффективность включения репарационной матрицы может быть существенным узким местом. Кроме того, требуется секвенирование ДНК, чтобы убедиться, что в геном внесена правильная мутация.

Мы разработали систему недорогого скрининга потенциальных точечных мутантов с использованием рестрикционного переваривания. Система позволяет исследователю проводить скрининг на введение двух аланина, двух глутаматов, двух аргининов, двух глицина или одного или двух стоп-кодонов с использованием ПЦР колоний и рестрикционного переваривания.В качестве доказательства концепции мы ввели мутации в UME6 , фактор транскрипции, который регулирует филаментацию и вирулентность C. albicans (Banerjee et al., 2008), и проверили включение репарационной матрицы с помощью ПЦР и рестрикционного расщепления. В частности, мы ввели мутации перед последовательностью, кодирующей ДНК-связывающий домен Ume6 Zn 2+ пальца. Мы обнаружили, что частота включения различных репарационных матриц в геном значительно различается. Мы охарактеризовали влияние этих мутаций на C.albicans филаментация. Поразительно, но введение стоп-кодона непосредственно перед ДНК-связывающим доменом UME6 Zn 2+ пальца устраняет филаментацию. Кроме того, мы обнаружили, что мутация двух консервативных положительно заряженных остатков в глутамат непосредственно перед ДНК-связывающим доменом UME6 Zn 2+ пальца привела к дефектам филаментации и снижению вирулентности C. albicans .

Материалы и методы

Клонирование и секвенирование

Праймеры, использованные в этом исследовании, перечислены в ().Праймеры для направляющей РНК Ume6 (Ume6 Guide 2 fr и rv) субклонировали в pv1093, как описано ранее (Vyas, Barrasa & Fink, 2015). Шаблоны для восстановления были сделаны с помощью ПЦР с использованием указанных пар праймеров. Продукты ПЦР очищали с использованием набора для очистки Zymo PCR Purification Kit. Осуществляли трансформацию ацетатом лития, и клетки высевали на чашки с агаром дрожжевой экстракт-пептон-декстроза, которые содержали 200 мкг / мл нурсеотрицина (Nat) (Gietz & Woods, 2002). Все питательные среды для этого исследования были дополнены 27 мМ уридином.Через три дня колонии Nat r наносили штрихами для выделения на среде YPD с добавлением 100 мкг / мл Nat. ПЦР колоний выполняли с использованием праймеров Ume6 ch primer 2 fr и rv. 10 мкл продукта ПЦР колоний расщепляли в соответствии с условиями реакции, рекомендованными производителем. Продукты расщепления и непереваренные продукты ПЦР разделяли на 2% агарозном геле, окрашивали бромидом этидия и визуализировали. Продукты ПЦР с моделями переваривания, соответствующими успешному мутагенезу, секвенировали с помощью GeneWiz, и для анализа последовательностей использовали SNAPgene.

Таблица 1

Олиго, использованные в этом исследовании.

Ограничения сайтов Последовательности в шаблонах ремонта выделены жирным шрифтом и заглавными буквами. Нуклеотиды, добавленные для клонирования в плазмиды CRISPR, в последовательностях направляющих праймеров выделены жирным шрифтом и курсивом.

BseRI BseRI 901 57 aatggcactaacaccaatactgattctacttctacttctaatccaatggt TTAATTAA аа
Название олиго Последовательность праймера Сайт ограничения
Ume6 Направляющая 2 fr ATTTG Tacttctacttctaatccame 8 AAAAC ttggattagaagtagaagta С XXXXXX
Ume6 ч праймер 2 FR ggtcatgatcatgatgatgaaaat XXXXXX
Ume6 ч праймер 2 с.в. ctccacaaattggtgtgacttc XXXXXX
Ume6 Р.П. 2_Glu FR atggcactaacaccaatactgattctacttctacttctaatccaatggtg GAGGAG AAAC
Ume6 гр 2_Glu с.в. catccttttttagatctaggtaataatcttcttcttgtatgttt CTCCTC caccattgga
Ume6 тр 2_TAA пт PAC1
Ume2 гр 2_TAA с.в. tccttttttagatctaggtaataatcttcttcttgtatgttt TTAATTAA accattggat PAC1
Ume6 тр 2_TGA пт atggcactaacaccaatactgattctacttctacttctaatccaatggt CTGAAG aaaca Acu1
Ume6 rp 2_TGA rv acatccttttttagatctaggtaataatcttcttcttgtatgttt CTTCAG accattgga Acu1

Анализы роста и филаментации

C.albicans выращивали в течение ночи при 25 ° C в YPD и разбавляли до OD 0,1. Четырехкратные серийные разведения высевали с использованием штифтового репликатора на YPD и Spider (Liu, Kohler & Fink, 1994). Жидкую филаментацию оценивали путем выращивания вариантов C. albicans в течение 24 часов в среде Spider Media при 37 ° C.

Galleria mellonella Инфекция

Здоровые (235 ± 45 мг) личинки случайным образом были отнесены к стерильным PBS, группам дикого типа или мутантным группам. Лог-фазные культуры C.albicans , выращенные при 37 ° C в YPD, дважды промывали и суспендировали в стерильном PBS. Перед каждой инъекцией шприц Гамильтона стерилизовали, промывая один раз этанолом, а затем дважды стерильным PBS. Личинок мазали 70% этанолом. 10 мкл либо стерильного PBS, либо 10 5 КОЕ C. albicans , суспендированных в стерильном PBS, вводили каждой личинке в левую заднюю ложноножку. Личинок инкубировали при 37 ° C в стеклянной чашке Петри и ежедневно оценивали выживаемость путем визуального осмотра и проталкивания стерильным наконечником пипетки.Умершие личинки удаляли из чашки ежедневно.

Результаты

Одним из наиболее сложных и дорогостоящих аспектов сайт-направленного мутагенеза является скрининг трансформантов для выявления тех, которые несут предполагаемую мутацию. Чтобы снизить стоимость и увеличить скорость скрининга трансформантов, мы идентифицировали последовательности распознавания рестрикционных ферментов, которые при введении преобразуют два кодона в кодоны, кодирующие два аланина, два аргинина, два глутамата, два глицина, стоп-кодоны ().Чтобы проверить нашу стратегию, мы котрансформировали C дикого типа. albicans с плазмидой, кодирующей Cas9 и направляющей РНК UME6 -направляющей, и ДНК-матрица репарации, созданная с помощью ПЦР, с последовательностями распознавания BseRI , PacI или AcuI . Опосредованная матрицей репарация заменяет UME6 остатков 2259-2265 (кодирующих Lys754 и Lys755) либо двумя отрицательно заряженными остатками глутамата (repairEE; последовательность BseRI ), либо стоп-кодоном TAA (repairTAA; последовательность PacI ) или TGA. стоп-кодон (repairTGA; последовательность AcuI ) (,).

Таблица 2

Сайты рестрикции, которые кодируют последовательные аминокислоты или стоп-кодоны.

Нуклеотидный код выглядит следующим образом: W = A или T, M = A или C, K = G или T, R = A или G, N = ATC или G, / = сайт расщепления. Цифры в круглых скобках соответствуют тому, насколько далеко ниже по течению участок разреза будет располагаться от последовательности распознавания.

Pac157 TA TTAAT / TAA
Продукт трансляции Кодон Последовательность сайта узнавания рестрикционного фермента
2 × аланин GCN BbvI GCAGCHN (8/12), NG87C GCAGCH (8/12), C G / CWGCN
2 × аргинин CGN Hpy99I CGWCGN /
2 × глутамат GAR G148 GAR GAGRI 900/8 GAGRI 900/8 GGC + GGA EciI GGCGGA (11/9)
1 × стоп-кодон TAG SpeI A / CTAGT
1 × Pac157
1 × стоп-кодон TGA AcuI CTGAAG (16/14)
2 × стоп-кодон TAG + TAA I-SceI TAGGGATAACAGGGTAAT (-9 / -13)
Введение сайтов рестрикции позволяет проводить эффективный скрининг на правильные точечные мутанты.

(A) Рисунок доменов Ume6 и ключевых остатков для этого исследования. Красная линия указывает на вырезанный сайт CRISPR. (B) Рестрикционная ПЦР колонии UME6 из репрезентативных ume6TAAStop и ume6-EE C. albicans . Переулок 1. Лестница, 2. ume6TAAStop непереваренный, 3. ume6TAAStop , расщепленный Pac1 4 . ume6-EE непереваренный 5. ume6-EE , расщепленный BseRI C-E. Анализ последовательности сайта ume6 Мутагенез репрезентативного неудачного мутанта (последовательность дикого типа) (C), ume6-EE (D) и ume6TAAStop (E) C. albicans аминокислотная последовательность представлена ​​выше Последовательность ДНК. Красный E обозначает сайт точечной мутации лизина в глутамат. Красный восьмиугольник обозначает место введения стоп-кодона.

В результате каждой трансформации образовывались десятки колоний. Мы использовали ПЦР колоний для амплификации UME6 из каждого трансформанта и расщепляли продукты ПЦР ферментом, который, как предполагалось, разрезает репарационную матрицу.2 из 48 трансформантов, трансформированных матрицей repairEE (разработанной для замены Lys754 / 755 глутаматами), были успешно переварены с помощью BseRI. 2 из 8 трансформантов, репарированных с помощью матрицы repairTAA (разработанной для введения стоп-кодона TAA), были успешно переварены с помощью PacI, а 2 из 48 трансформантов, репарированных с помощью repairTGA (разработанной для введения стоп-кодона TGA), были успешно переварены с помощью AcuI (). Мы секвенировали трансформанты с моделями рестрикционного переваривания, соответствующими успешному мутагенезу.Мы обнаружили, что успешно переваренные клоны правильно вводили гомозиготные точечные мутации в гене UME6 (и). Кроме того, мы не наблюдали непреднамеренных мутаций в UME6, и не обнаружили гетерозиготных мутантов. Мы также секвенировали продукты ПЦР, которые не переваривались; как и предполагалось, эти трансформанты сохранили последовательность UME6 дикого типа (). Перечислены названия и генотипы штаммов, используемых в дальнейших исследованиях (). Наши данные показывают, что рестрикционное переваривание является быстрой и точной стратегией скрининга сайт-направленного мутагенеза у C.Альбиканс .

Таблица 3

Штаммы, использованные в этом исследовании.

albicans филаментации и единственный домен в Ume6, предсказанный гомологией последовательностей, это ДНК-связывающий домен Zn 2+ finger (аминокислоты 760-810) (Banerjee et al., 2008). С-концевой участок Ume6 (аминокислоты 811-844) является высококонсервативным, но не предполагается, что он образует известный структурный домен (Inglis et al., 2012). Мы предположили, что палец Zn 2+ и C-конец Ume6 важны для филаментации. Мы не обнаружили ни дрожжей, несущих преждевременный стоп-кодон ( ume6-stopTAA) , ни дрожжей, экспрессирующих точечные мутанты лизин-глутамат ( ume6-EE ), которые не демонстрировали медленного роста по сравнению с диким типом C.albicans при различных температурах на богатой среде (). Однако мы обнаружили, что дрожжи дикого типа демонстрируют более выраженную морфологию сморщенных колоний, чем дрожжи ume6-EE или ume6-stopTAA на богатой среде при 37 ° C ().

Оценка мутаций UME6 по филаментации и вирулентности.

(A) Дикий тип, ume6-EE и ume6-stopTAA C. albicans культивировали на среде Spider при 30 и 37 ° C в течение 7 дней и оценивали на предмет филаментации.(B) Четырехкратные серийные разведения дикого типа, ume6-EE и ume6-stopTAA C. albicans инкубировали на среде YPD при 37 ° C в течение трех дней. (C) Дикий тип и ume6-stopTAA , инкубированные в жидкой среде Spider, оценивали на филаментацию через 24 часа. (D) 10 5 КОЕ дикого типа, ume6-EE и UME6-stopTAA C. albicans вводили личинкам восковой моли, которые затем инкубировали при 37 ° C. Выживаемость личинок отслеживалась с течением времени.Wt был более вирулентным, чем ume6-EE ( P = 0,036), и более вирулентным, чем ume6-stopTAA ( P <0,001). Кроме того, ume6-EE был более вирулентным, чем ume6-stopTAA ( P = 0,003). Результаты представляют собой общую выживаемость пяти независимых экспериментов с 10 личинками на обработку. Кривые выживаемости были построены с использованием метода Каплана-Мейера, а статистический анализ был выполнен с использованием логарифмического рангового теста для множественных сравнений (IBM SPSS Statistics; SPSS, Армонк, Нью-Йорк, США).

Дикий тип, но не гомозиготный ume6 / ume6 C. albicans претерпевает филаментацию при культивировании на среде для пауков (Banerjee et al., 2008). Мы проверили, важны ли ДНК-связывающий домен и консервативные положительно заряженные остатки Lys754 и Lys755 выше для индукции филаментации C. albicans . Мы проанализировали филаментацию дрожжей дикого типа ume6-EE и ume6-stopTAA на среде с паутинным агаром. Мы обнаружили, что, в то время как дрожжевые филаменты дикого типа устойчивы через 7 дней, дрожжи ume6-stopTAA не смогли филаментировать ().Кроме того, мы обнаружили, что дрожжи ume6-EE демонстрируют промежуточную филаментацию (). Мы наблюдали аналогичные паттерны филаментации при культивировании этих штаммов в жидких средах для пауков ().

Затем мы проверили влияние наших точечных мутаций на вирулентность C. albicans на модели восковой моли. ume6 / ume6 дрожжи проявляют более низкую вирулентность на модели мышей (Banerjee et al., 2008), и их вирулентность не тестировалась на модельной системе восковой моли. Менее 30% личинок инъецировали диким типом C.albicans выжили после 200 ч инкубации. Для сравнения, мутация ume6-stopTAA значительно снижает вирулентность, при этом примерно 80% выживаемости после 200 ч инкубации (). В соответствии с нашими данными о филаментации, мы обнаружили, что дрожжи ume6-EE проявляли промежуточную вирулентность по сравнению с дрожжами дикого типа, а UME6stop-TAA дрожжи, при этом более 40% личинок выживали после 200 часов инкубации . Наши данные показывают, что последние 100 аминокислот Ume6, которые включают пальчиковый домен Zn 2+ и консервативную С-концевую область, важны для C.albicans филаментация и вирулентность. Кроме того, наши данные предполагают, что остатки Lys754 и Lys755, которые лежат на N-конце пальцевого домена Zn 2+ , также важны для филаментации и вирулентности.

Обсуждение

Мы идентифицировали последовательности распознавания рестрикционного фермента, которые при трансляции кодируют последовательные идентичные аминокислоты или один или два стоп-кодона. Заменив два кодона этими сайтами рестрикции, мы смогли эффективно ввести и подтвердить замену двух последовательных аминокислот с помощью ПЦР с последующим рестрикционным расщеплением.В случае, если расщепление и секвенирование неубедительны, включение сайта рестрикции также позволяет легко проводить скрининг правильных трансформантов с помощью саузерн-блоттинга, что требует больше времени, но потенциально необходимо, чтобы гарантировать отсутствие дополнительных копий последовательности ДНК и вашу мутацию. представляющих интерес. Мы обнаружили, что не все шаблоны репарации включаются в геном с одинаковой эффективностью. Эта вариабельность успешной рекомбинации увеличивает полезность быстрого скрининга многочисленных колоний путем переваривания.Наш метод позволил нам однозначно, недорого и быстро идентифицировать желаемые мутации в транскрипционном факторе C. albicans , UME6 . Хотя мы не наблюдали гетерозигот, наша стратегия рестрикции должна отличать гомозиготные мутации от гетерозиготных. Наши данные предполагают, что Ume6 Lys754 и Lys755 важны для филаментации и вирулентности. Кроме того, наши данные показывают, что ДНК-связывающий домен Zn 2+ пальца и консервативный C-концевой домен также важны для филаментации и вирулентности.

Мы идентифицировали сайты узнавания рестрикционного фермента, которые кодируют два последовательных аланина, глутаматы, аргинины и глицины, а также один или два стоп-кодона. Классически сайт-направленный мутагенез вводит изменение одной аминокислоты, но скрининг таких изменений с использованием рестрикционного переваривания нецелесообразен. Введение сайтов рестрикции с сайтами узнавания из четырех оснований (например, GCGC, который может расщепляться HinP1I или HhaI) может быть использовано для введения одного аланина; однако дополнительное основание на 5′- или 3′-конце последовательности распознавания из четырех оснований накладывает ограничения на последовательность выше или ниже, что ограничивает его полезность.

Введение стоп-кодонов может использоваться для усечения С-конца белка. Однако мутации супрессоров стоп-кодонов могут обойти эти мутации. Введение сайта рестрикции I-SceI вводит два различных стоп-кодона (TAG и TAA) и, таким образом, с меньшей вероятностью будет обойти супрессорными мутациями. Мы попытались ввести сайт I-SceI в UME6 , используя репарационный шаблон из 100 пар оснований, и провели скрининг более 50 трансформантов с помощью рестрикционного переваривания. К сожалению, ни один из этих трансформантов не включал репарационный шаблон.Эта очевидная неэффективность может быть связана с немного укороченными областями гомологии на шаблоне репарации по сравнению с шаблонами успешной репарации. Умеренное увеличение размера шаблона восстановления может преодолеть это ограничение. Альтернативно, последовательные сайты рестрикции SpeI, PacI или AcuI в одной репарационной матрице могут быть использованы для введения последовательных стоп-кодонов и снижения вероятности подавления.

Не все кодоны одинаково используются в геномах. Например, в C. albicans GCN (N представляет любое основание) кодирует аланин, но 43% аланина кодируется GCT и менее 5% — GCG (Arnaud et al., 2005). Такое смещение кодонов необходимо учитывать, когда исследователи решают, какой сайт рестрикции ввести. Редкие кодоны могут изменять экспрессию белка, затрудняя интерпретацию фенотипов, связанных с вариантами белка (Quax et al., 2015). Мы идентифицировали три сайта рестрикции, которые кодируют последовательные остатки аланина (). Эти сайты распознавания ферментов обнаруживаются с разной частотой по всему геному и позволяют ввести любой кодон аланина. Этот набор ферментов обеспечивает гибкость исследователя при разработке эксперимента по мутагенезу.

Сайт-направленный мутагенез рестрикционный скрининг может быть исключительно полезен для исследования локализации белка. Белки используют короткие консервативные аминокислотные последовательности для локализации в различных внутриклеточных компартментах, включая эндоплазматический ретикулум, митохондрии, пероксисому и ядро ​​(Nakai, 2000). Эти мотивы последовательности часто являются заряженными или гидрофобными. Нарушение таких мотивов последовательностей является критическим при анализе функции этих белков in vivo .Сайт-направленный мутагенез может заменить эти аминокислоты другими, обладающими другими биохимическими характеристиками. Наша система скрининга позволит эффективно исследовать роль сигнальных мотивов в локализации белка.

Мы опробовали нашу стратегию, основанную на рестрикционном переваривании, для скрининга точечных мутаций в UME6 . Ume6 является регулятором транскрипции филаментации, а делеция UME6 вызывает дефекты филаментации и снижение вирулентности в моделях мышей (Banerjee et al., 2008). Однако мало что было известно о функциях структурных элементов в Ume6. Ume6 состоит из предсказанного Zn 2+ ДНК-связывающего домена пальца, консервативного C-концевого домена и плохо консервативного N-концевого домена с неизвестной функцией (). Наши данные показывают, что домен пальца Zn 2+ и / или С-концевой домен играет роль в филаментации, поскольку введение стоп-кодона выше этих доменов привело к снижению филаментации и вирулентности (-). Одна из возможных интерпретаций заключается в изменении консервативных остатков лизина непосредственно на N-конце домена пальца Zn 2+ вызывает дефектов филаментации и вирулентности.Это предполагает, что Lys754 и / или Lys755 играют ранее недооцененную роль в активации программы филаментации. Альтернативно, изменение Lys754 и / или Lys755 может привести к дестабилизации и / или снижению экспрессии функционального белка. Кодоны Glu, которые были введены, кодируют 21% остатков Glu в Candida , поэтому маловероятно, что использование кодонов является ограничивающим. Хотя N-концевой домен Ume6 не так высококонсервативен, как его пальцевые или С-концевые домены Zn 2+ , он действительно содержит ряд высококонсервативных остатков.Дальнейший сайт-направленный мутагенез N-концевого домена Ume6 поможет выяснить роль Ume6 в программе филаментации C. albicans.

Сайт-направленный мутагенез в сочетании со скринингом рестрикционного переваривания может быть широко применим во многих отношениях. Во-первых, разработка CRISPR-опосредованных систем редактирования генома значительно расширила круг организмов, которые можно легко генетически модифицировать (Reardon, 2016). Эти достижения, вероятно, произведут революцию в создании нокаут-библиотек для множества организмов.Для организмов, которым требуется репарационная матрица для введения мутаций, таких как C. albicans (Vyas, Barrasa & Fink, 2015), введение стоп-кодонов, которые могут быть проверены рестрикционным перевариванием, может быть важным компонентом эффективной и точной подготовки и проверки библиотеки. . Во-вторых, исследовательские проекты бакалавриата являются важнейшим компонентом образования, но выявить проекты, которые волнуют студентов и которые могут быть выполнены в рамках учебной программы бакалавриата, является сложной задачей.Это может быть особенно сложно для студентов, интересующихся молекулярной биологией, где часто требуется клонирование и разработка реагентов, прежде чем можно будет начать экспериментальную проверку гипотезы. Введение мутаций с использованием CRISPR и скрининг на правильные мутации с использованием рестрикционного переваривания — это быстрый метод, с помощью которого студенты бакалавриата могут изучить и применить несколько методов молекулярной биологии. Относительно высокий уровень успеха и умеренная стоимость этих методов позволяют студентам продвигать проекты вперед, задавая и отвечая на важные биологические вопросы.Кроме того, низкая стоимость и скорость этих процедур делают эти упражнения подходящими для учебных лабораторий бакалавриата.

Выводы

Мы идентифицировали сайты разреза рестрикционными ферментами, которые кодируют последовательные аланин, глутамат, аргинин, глицин или стоп-кодоны. Включение этих сайтов позволяет эффективно идентифицировать правильные точечные мутации с использованием рестрикционного переваривания. Используя CRISPR, мы ввели эти сайты в C. albicans UME6 , заменив Lys754 и Lys755 либо на два остатка глутамата, либо на стоп-кодон.Мы обнаружили, что Lys754 и Lys755 важны для филаментации и вирулентности. Сайт-направленный мутагенез в сочетании со скринингом рестрикционного переваривания — это быстрый и экономичный метод скрининга потенциальных точечных мутантов.

Дополнительная информация

Данные S1
Уровень смертности личинок вариантов Ume6 по сравнению с диким типом C. albicans :

Необработанные данные для эксперимента по оценке уровня смертности личинок в 2С.

Благодарности

Авторы также хотели бы поблагодарить Dr.Дженнифер Магер и доктор Эрик (VJ) Рубинштейн за полезные комментарии относительно рукописи.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана грантом национальных институтов 1R15AI130950-01 Дугласу А. Бернштейну и стажировкой «Пасхальная печать» Оливии Л. Смит. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Дополнительная информация и заявления

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

Бен А. Эванс и Итан С. Пикерилл задумали и спланировали эксперименты, провели эксперименты, проанализировали данные, предоставили реагенты / материалы / инструменты анализа, подготовили рисунки и / или таблицы, написали или отрецензировали черновики документ, утвержден окончательный проект.

Оливия Л. Смит задумала и разработала эксперименты, провела эксперименты, проанализировала данные, внесла реагенты / материалы / инструменты для анализа, написала или отрецензировала черновики статьи, одобрила окончательный черновик.

Дуглас А. Бернстайн задумал и разработал эксперименты, проанализировал данные, предоставил реагенты / материалы / инструменты для анализа, подготовил рисунки и / или таблицы, создал или рассмотрел черновики статьи, одобрил окончательный вариант.

Доступность данных

Следующая информация была предоставлена ​​относительно доступности данных:

Необработанные данные представлены в дополнительном файле.

Ссылки

Arnaud et al. (2005) Арно МБ, Костанцо М.С., Скржипек М.С., Бинкли Дж., Лейн С, Миясато С.Р., Шерлок Г.База данных генома Candida (CGD), ресурс сообщества для информации о генах и белках Candida albicans. Исследования нуклеиновых кислот. 2005; 33: D358 – D363. DOI: 10.1093 / нар / gki003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Banerjee et al. (2008) Banerjee M, Thompson DS, Lazzell A, Carlisle PL, Pierce C, Monteagudo C, Lopez-Ribot JL, Kadosh D. UME6, новый филамент-специфический регулятор удлинения и вирулентности гиф Candida albicans. Молекулярная биология клетки. 2008; 19: 1354–1365. DOI: 10.1091 / mbc.E07-11-1110. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Bernstein & Keck (2005) Bernstein DA, Keck JL. Придание субстратной специфичности ДНК-геликазам: роль домена RecQ HRDC. Структура. 2005; 13: 1173–1182. DOI: 10.1016 / j.str.2005.04.018. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Bortfeldt et al. (2008) Bortfeldt R, Schindler S, Szafranski K, Schuster S, Holste D. Сравнительный анализ характеристик последовательностей, участвующих в распознавании тандемных сайтов сплайсинга. BMC Genomics. 2008; 9: 202.DOI: 10.1186 / 1471-2164-9-202. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Cormack & Castano (2002) Cormack B, Castano I. Введение точечных мутаций в клонированные гены. Руководство по генетике дрожжей, молекулярной и клеточной биологии — Часть B. 2002; 350: 199–218. DOI: 10.1016 / S0076-6879 (02) 50964-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Cunningham & Wells (1989) Cunningham BC, Wells JA. Картирование эпитопов Hgh-рецепторов с высоким разрешением с помощью мутагенеза со сканированием аланина. Наука. 1989; 244: 1081–1085.DOI: 10.1126 / science.2471267. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Домингес, Лим и Ци (2016) Домингес А.А., Лим В.А., Ци Л.С. Помимо редактирования: перепрофилирование CRISPR-Cas9 для точной регуляции генома и исследования. Обзоры природы Молекулярная клеточная биология. 2016; 17: 5–15. DOI: 10.1038 / nrm.2015.2. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Gietz & Woods (2002) Gietz RD, Woods RA. Трансформация дрожжей методом ацетата лития / одноцепочечной ДНК-носителя / полиэтиленгликоля. Методы в энзимологии.2002; 350: 87–96. DOI: 10.1016 / S0076-6879 (02) 50957-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Hodgens, Nimchuk & Kieber (2017) Hodgens C, Nimchuk ZL, Kieber JJ. indCAPS: инструмент для разработки скрининговых праймеров для событий мутагенеза CRISPR / Cas9. PLOS ONE. 2017; 12: e0188406. DOI: 10.1371 / journal.pone.0188406. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Inglis et al. (2012) Inglis DO, Arnaud MB, Binkley J, Shah P, Skrzypek MS, Wymore F, Binkley G, Miyasato SR, Simison M, Sherlock G. База данных генома Candida включает несколько видов Candida: инструменты для поиска и анализа мультивидов с курируемым геном и информация о белках Candida albicans и Candida glabrata.Исследования нуклеиновых кислот. 2012; 40: D667 – D674. DOI: 10.1093 / nar / gkr945. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Джонс и др. (2004) Jones T, Federspiel NA, Chibana H, Dungan J, Kalman S, Magee BB, Newport G, Thorstenson YR, Agabian N, Magee PT, Davis RW, Scherer S. Последовательность диплоидного генома Candida albicans. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 2004; 101: 7329–7334. DOI: 10.1073 / pnas.0401648101. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Лю, Колер и Финк (1994) Лю Х., Колер Дж., Финк Г.Р.Подавление образования гиф у Candida albicans путем мутации гомолога STE12. Наука. 1994; 266: 1723–1726. DOI: 10.1126 / science.79. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Muzzey et al. (2013) Muzzey D, Schwartz K, Weissman JS, Sherlock G. Сборка поэтапного диплоидного генома Candida albicans облегчает аллель-специфические измерения и обеспечивает простую модель для повторяющейся и нестандартной структуры. Геномная биология. 2013; 14: R97. DOI: 10.1186 / ГБ-2013-14-9-r97. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Nakai (2000) Nakai K.Сигналы сортировки белков и прогноз субклеточной локализации. Достижения в химии белков. 2000; 54: 277–344. DOI: 10.1016 / S0065-3233 (00) 54009-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Нефф и др. (1998) Нефф М.М., Нефф Дж. Д., Чори Дж., Пеппер А. dCAPS, простой метод генетического анализа однонуклеотидных полиморфизмов: экспериментальные применения в генетике Arabidopsis thaliana. Заводской журнал. 1998. 14: 387–392. DOI: 10.1046 / j.1365-313X.1998.00124.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Quax et al.(2015) Quax TEF, Claassens NJ, Soll D, Van der Oost J. Смещение кодонов как средство точной настройки экспрессии генов. Молекулярная клетка. 2015; 59: 149–161. DOI: 10.1016 / j.molcel.2015.05.035. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Шортл, ДиМайо и Натанс (1981) Шортл Д., ДиМайо Д., Натанс Д. Направленный мутагенез. Ежегодный обзор генетики. 1981; 15: 265–294. DOI: 10.1146 / annurev.ge.15.120181.001405. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Szewczuk, Tarrant & Cole (2009) Szewczuk LM, Tarrant MK, Cole PA.Фосфорилирование белков полусинтезом: от бумаги к практике. Методы в энзимологии: неприродные аминокислоты. 2009; 462: 1–24. DOI: 10.1016 / S0076-6879 (09) 62001-2. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Thorsness & Koshland (1987) Thorsness PE, Koshland DE. Инактивация изоцитратдегидрогеназы путем фосфорилирования опосредуется отрицательным зарядом фосфата. Журнал биологической химии. 1987; 262: 10422–10425. [PubMed] [Google Scholar] Во Нгок и др. (2017) Vo Ngoc L, Wang YL, Kassavetis GA, Kadonaga JT.Прочный промотор ядра РНК-полимеразы II. Гены и развитие. 2017; 31: 1289–1301. DOI: 10.1101 / gad.303149.117. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Вяс, Барраса и Финк (2015) Вяс В.К., Барраса М.И., Финк Г.Р. Система CRISPR позволяет генную инженерию основных генов и семейств генов. Наука продвигается. 2015; 1: e1500248. DOI: 10.1126 / sciadv.1500248. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Vyas et al. (2018) Вяс В.К., Бушкин Г.Г., Бернштейн Д.А., Гетц М.А., Севастиник М., Барраса М.И., Бартель Д.П., Финк Г.Р.Новые стратегии мутагенеза CRISPR выявляют различия в механизмах репарации у грибов. мСфера. 2018; 3: 1–14. DOI: 10.1128 / mSphere.00154-18. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Ван, Ла Русса и Ци (2016) Ван Х, Ла Русса М., Ци Л.С. CRISPR / Cas9 в редактировании генома и не только. Ежегодный обзор биохимии. 2016; 85: 227–264. DOI: 10.1146 / annurev-biochem-060815-014607. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Weiss et al. (2000) Вайс Г.А., Ватанабе С.К., Чжун А., Годдард А., Сидху СС. Быстрое картирование функциональных эпитопов белков с помощью комбинаторного сканирования аланина.Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 2000; 97: 8950–8954. DOI: 10.1073 / pnas.160252097. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] Winter et al. (1982) Winter G, Fersht AR, Wilkinson AJ, Zoller M, Smith M. Изменение структуры фермента посредством сайт-направленного мутагенеза: тирозил-тРНК-синтетаза и связывание АТФ. Природа. 1982; 299: 756–758. DOI: 10.1038 / 299756a0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Ограничение переваривания ферментов | NEB

Рестрикционное ферментное переваривание | NEB Принимать файлы cookie

Мы используем файлы cookie, чтобы понять, как вы используете наш сайт, и улучшить общий пользовательский опыт.Это включает в себя персонализацию контента и рекламы. Чтобы узнать больше и управлять файлами cookie, обратитесь к нашему Заявлению о файлах cookie .

Список продуктов Обзор приложения

Подготовка ДНК для традиционных методов клонирования зависит от переваривания рестрикционными ферментами для получения совместимых концов, которые можно лигировать вместе. Клонируемая ДНК может широко варьироваться от геномной ДНК, выделенной из чистой бактериальной культуры или смешанной популяции, до ранее клонированного гена, который необходимо перенести из одного вектора в другой (субклонирование).Рестрикционные ферменты также можно использовать для создания совместимых концов продуктов ПЦР. Во всех случаях один или несколько рестрикционных ферментов используются для переваривания ДНК, что приводит к ненаправленной или направленной вставке в совместимую плазмиду.

Геномная ДНК, независимо от источника, обычно переваривается рестрикционными ферментами, которые распознают 6-8 последовательных оснований, поскольку эти сайты узнавания встречаются в геноме реже, чем сайты с 4 основаниями, и приводят к образованию более крупных фрагментов ДНК.Желаемый размер вставки для библиотеки клонов определяет, какие ферменты выбираются, а также условия переваривания. Чаще всего для переваривания исходного материала используют серийное разведение выбранного рестрикционного фермента (ов), и желаемый диапазон размеров вставки выделяют с помощью электрофореза с последующей экстракцией ДНК в геле. Этот метод приготовления обеспечивает фрагменты ДНК желаемого размера с концами, совместимыми с выбранной векторной ДНК.

Субклонирование требует использования 1-2 рестрикционных ферментов, которые разрезают непосредственно за пределами фрагмента вставки, не разрезая внутри самой вставки.Обычно используются рестрикционные ферменты, у которых есть сайт узнавания в пределах сайта множественного клонирования (MCS), поскольку они не разрезаются где-либо еще в векторной ДНК и обычно производят два легко разделяемых фрагмента ДНК. Представляющий интерес ген чаще всего субклонируют в вектор экспрессии для улучшения экспрессии белка и / или добавления метки очистки. В этом случае важно, чтобы ген был вставлен в правильной ориентации и в рамке с промотором транскрипции.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) обычно используется для амплификации интересующего гена или фрагмента ДНК из любого источника ДНК, подлежащего клонированию.Для создания совместимых концов обычно добавляют сайты рестрикции к 5’-концу обоих праймеров для ПЦР. При добавлении сайтов рестрикции к праймеру для ПЦР рекомендуется включать 6 оснований между сайтом узнавания и 5 ’концом праймера. Эти дополнительные основания обеспечивают достаточное количество ДНК для рестрикционного фермента, чтобы связывать сайт узнавания и эффективно разрезать. При выборе сайта (ов) рестрикции для добавления к праймерам важно определить, какой сайт (ы) будет совместим с выбранным вами вектором, желательно ли направленное клонирование и, что наиболее важно, подтвердить, что сайт (ы) распознавания не встречается в гене или фрагменте ДНК.


Выберите тип:
FAQs Протоколы Инструменты и ресурсы Публикации Легальная информация

Часто задаваемые вопросы по ограничению переваривания ферментов

Протоколы рестрикционного переваривания ферментов

    Публикации, связанные с рестрикционным ферментным перевариванием

  1. Fu YB, Peterson G. W., Dong Y 2016. Увеличение выборки генома и улучшение генотипирования SNP для генотипирования путем секвенирования с новыми комбинациями рестрикционных ферментов G3 .6: 4, PubMedID: 26818077, DOI:
  2. Shah, S., Sanchez, J., Stewart, A., et al. 2015. Исследование вторичного олигомера активированного SgrAI, связанного с ДНК PLoS One . 10 (4), PubMedID: 25880668, DOI: 10.1371 / journal.pone.0124783.
  3. Loenen, W.A., Raleigh, E.A. 2014. Другая сторона ограничения: ферменты, зависимые от модификации. Nucleic Acids Res . 42, PubMedID: 239

    , DOI:

Легальная информация

Этот продукт защищен одним или несколькими патентами, товарными знаками и / или авторскими правами, принадлежащими или контролируемыми New England Biolabs, Inc (NEB).

Хотя NEB разрабатывает и проверяет свои продукты для различных приложений, использование этого продукта может потребовать от покупателя получения дополнительных прав на интеллектуальную собственность третьих лиц для определенных приложений.

Для получения дополнительной информации о коммерческих правах, пожалуйста, свяжитесь с командой NEB по развитию глобального бизнеса по адресу [email protected].

Этот продукт предназначен только для исследовательских целей. Этот продукт не предназначен для использования в терапевтических или диагностических целях у людей или животных.

Видео

  1. Что такое рестрикционный фермент II типа?

    Ферменты рестрикции

    типа II чаще всего используются для приложений молекулярной биологии, поскольку они распознают стереотипные последовательности и создают предсказуемый образец расщепления. Узнайте больше о том, как работают RE типа II.

  2. Что такое рестрикционный фермент I типа?

    Ферменты рестрикции типа I представляют собой группу эндонуклеаз, которые распознают двудольную последовательность, но не создают предсказуемую картину расщепления.Узнайте больше о том, как работают RE типа I.

  3. Что такое рестрикционный фермент III типа?

    Рестрикционные ферменты типа III представляют собой группу эндонуклеаз, которые распознают непаллиндромную последовательность, включающую два обратных сайта. Узнайте больше об этих малоизученных ферментах.

  4. Клонирование рестрикционными ферментами

    Рестрикционные ферменты являются неотъемлемой частью рабочего процесса клонирования для создания совместимых концов на фрагментах и ​​векторах.В этом анимационном ролике обсуждаются три правила определения рестрикционных ферментов, которые следует использовать в вашем эксперименте по клонированию.

  5. Стандартный протокол для рестрикционных ферментов

    Позвольте одному из экспертов NEB по рестрикционным ферментам помочь вам улучшить вашу технику и избежать типичных ошибок при настройке дайджеста.

  6. Почему мой рестрикционный фермент не разрезает ДНК?

    Не получается ожидаемого декольте? Позвольте ученому NEB помочь вам устранить вашу реакцию.

  7. Проблема рестрикционного переваривания ферментов: слишком много полос ДНК

    Вы обнаруживаете неожиданные полосы в своей реакции пищеварения? Вот несколько советов, которые помогут определить причину.

  8. Что такое звездная активность рестрикционного фермента?

    Узнайте, что такое Star Activity, почему оно вредно для точного переваривания рестриктазами и как HF-ферменты NEB созданы, чтобы этого избежать.

  9. Уменьшите звездную активность с помощью высокоточных рестрикционных ферментов

    NEB разработала ферменты HF® для устранения звездной активности.Узнайте, как и что это значит для ваших дайджестов.

  10. NEB

    ® Протокол двойного переваривания ферментов рестрикции

    Двойное пищеварение может сэкономить ваше время, и это видео может предложить советы о том, как достичь наилучших результатов, независимо от того, какой из рестрикционных ферментов NEB вы используете.

  11. Протокол рестрикционного переваривания ферментов: разрезание близко к концу ДНК

    При разрезании близко к концу молекулы ДНК убедитесь, что вы знаете, сколько оснований добавить к концам ваших праймеров для ПЦР.

  12. Проблема переваривания ферментов рестрикции: мазок ДНК на агарозном геле

    Узнайте больше о причинах этой распространенной проблемы и о том, как проверяются ферменты NEB, чтобы избежать размазывания ДНК.

  13. Рестрикционные ферменты в сборке Golden Gate

    Ферменты рестрикции IIS типа

    имеют как сайты узнавания, так и сайты связывания, но срезаются ниже сайта узнавания, создавая выступающие части из 4 оснований, идеально подходящие для повторной сборки. Просмотрите список ферментов TypeIIS.

  14. Рестрикционные ферменты в оптическом картировании

    Оптическое картирование — это метод, позволяющий создавать рестрикционные карты целых хромосом или геномов. Узнайте больше об оптическом картировании.

Рекомендуемые товары

Другой связанный контент

Сессия истекла

Вы бездействовали более 20 минут, в целях безопасности вы вышли из системы. Пожалуйста, войдите снова, чтобы продолжить сеанс.

Войти

Организация изменена

Ваш профиль привязан к учреждению, пожалуйста, войдите еще раз, чтобы завершить обновление вашего профиля.

Войти

Быстрый точный последовательный алгоритм для задачи частичного дайджеста | BMC Bioinformatics

В этом разделе мы представляем три алгоритма. Первый — лучший из предыдущих практических алгоритмов, а два других алгоритма — предложенные алгоритмы.

Лучший предыдущий практический алгоритм

Основная цель PDP — восстановить элементы, x и , из мультимножества, D , из N = n ( n — 1) / 2 целых числа, найдя такой набор X , что ΔX = D .Самый известный алгоритм решения PDP основан на стратегии ветвей и границ. Основная идея этого алгоритма состоит в постепенном построении набора X . Алгоритм основан на алгоритме поиска в глубину с двумя ограничивающими условиями. Мы называем этот метод алгоритмом BBd ( b ранчо и b ound на основе d epth).

Наблюдение

На рисунке 1 показано выполнение алгоритма BBd на D = {1, 2, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 8, 10}.На рисунке мы используем следующие обозначения.

Рис. 1

Отслеживание алгоритма BBd на D = {1, 2, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 8, 10}

  1. я.

    Каждый узел в дереве решений для PDP представляет пару наборов ( D i k , X i k ), где индекс k представляет номер уровня, а индекс i представляет номер узла на уровне k .

  2. II.

    Число t внутри круга в правом верхнем углу каждого узла представляет t -й вызов процедуры Place.

  3. iii.

    Символ «⊥» используется, когда текущий узел не генерирует никаких новых элементов.

Понятно, что на уровне 0 в корне находится мультимножество D 0 0 = {1, 2, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 8} и набор X 0 0 = {0, 10}. В общем Х 0 0 = {0, ширина } и D 0 0 = D \ { ширина }, где D — вход PDP . Дополнительно каждый узел ( D к к , X к к ) на уровне k, k > 0, дерева решений генерирует не более двух узлов на уровне k + 1 следующим образом:

  1. 1.

    Добавить элемент от y до X к к для создания X i k + 1 = X к к ∪ { y }.

  2. 2.

    Убрать элементы Δ ( y , X к к ) из D к к для создания D i k + 1 = D к к \ Δ ( y , X к к ).

, где y = Макс ( D к к ) или y = ширина — Макс. ( D к к ). Мы также наблюдаем на рис.1 следующее:

  1. 1.

    Есть две идентичные подзадачи ( D 0 2 , X 0 2 ) и ( D 1 2 , Х 1 2 ), так что D 0 2 = D 1 2 = {1, 3, 5, 7} и X 0 2 = X 1 2 = {0, 2, 8, 10}.

  2. 2.

    Две идентичные подзадачи приводят к двум идентичным решениям: {0, 2, 7, 8, 10} и {0, 2, 3, 8, 10}.

Первый предложенный метод

В этом подразделе мы предлагаем эффективный метод, который сокращает время работы PDP. Метод основан на обходе дерева решений для PDP с использованием стратегии в ширину вместо стратегии в глубину.Мы также рассматриваем два ограничивающих условия, которые используются в алгоритме BBd. Более того, мы удаляем все идентичные подзадачи на одном уровне. Основные этапы нашего метода следующие:

  1. 1.

    Постройте дерево решений для PDP, используя стратегию «в ширину», уровень за уровнем.

  2. 2.

    Перед созданием узлов нового уровня мы удаляем все повторяющиеся узлы, существующие на текущем уровне, так что любой узел появляется только один раз на текущем уровне.

Алгоритм BBb ( b ранчо и b ound на основе чтения b ) показывает этапы предлагаемого нами метода решения PDP. На вход алгоритма поступает мультимножество D , состоящее из n ( n — 1) / 2 элементов. Первоначально алгоритм начинается с двух наборов и двух списков. Два набора: X 0 0 = {0, ширина } и D 0 0 = D \ { ширина }.Два списка: L Х = { X 0 0 } и L D = { D 0 0 }. В общем L D и L Х представляют собой списки комплектов, D к к и X к к , соответственно, на текущем уровне, k , дерева решений.Основным шагом предлагаемого алгоритма является цикл while, который представляет количество уровней в дереве решений для PDP. На каждой итерации k цикла while мы будем генерировать элементы следующего уровня, k + 1, вызывая процедуру GenerateNextLevel ( L D , L Х , S ), k ≥ 0.Входами процедуры являются три списка наборов, L D , L Х и S , для текущего уровня k . Выходы процедуры — три списка наборов, L D , L Х и S , для уровня k + 1.

Тело процедуры GenerateNextLevel состоит из инициализации и цикла. При инициализации мы будем использовать два вспомогательных списка, AL D и AL Х , в состав которых входят наборы D j k + 1 и X j k + 1 , соответственно, для следующего уровня в дереве решений.Начальное значение двух списков пусто. Основной цикл в процедуре GenerateNextLevel представляет процесс генерации элементов следующего уровня и сохранения их в двух вспомогательных списках AL D и AL Х . Каждая пара комплектов, D i k L D и X i k L Х , сгенерирует не более двух пар наборов, как показано ниже:

  1. (я)

    D j k + 1 = D i k \ Δ ( y , X i k ) и X j k + 1 = X i k ∪ { y }, если условие Δ ( y , X i k ) ⊆ D i k верно.

  2. (ii)

    D л к + 1 = D i k \ Δ ( ширина y , X i k ) и X л к + 1 = X i k ∪ { ширина y }, если условие Δ ( ширина y , X i k ) ⊆ D i k верно.

Два набора, X j k + 1 и D j k + 1 и аналогичным образом X л к + 1 и D l k + 1 , будет добавлено во вспомогательные списки AL Х и AL D , соответственно если установить X j k + 1 не существует в списке AL Х .

Основной цикл процедуры GenerateNextLevel завершится, когда отобразится список L D пусто. Это означает, что все элементы текущего уровня k заменяются новыми элементами на следующем уровне k + 1. В этом случае мы назначаем списки AL D и AL Х С по L D и L Х соответственно.На рисунке 2 показано, как работает эта идея.

Рис. 2

Отслеживание алгоритма BBb на D = {1, 2, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 8, 10}

Теперь мы исследуем, как проверить равенство между двумя узлами ( D i k , X i k ) и ( D к j , X к к ) в дереве решений для PDP.Тест можно провести, сравнив равенство между D i k и D к к и равенство между X i k и X к к .Следующие теоремы и следствие доказывают, что два узла ( D i k , X i k ) и ( D к к , X к к ) равны, если набор X i k совпадает с набором X к к .

Теорема 1: Дана подзадача ( D i k , X i k ) в дереве решений для PDP отношение D i k = D \ Δ X i k действительно, где k ≥ 0, D — вход PDP, D i k — это модифицированная версия D , произведенная путем удаления некоторых его элементов и X i k содержит k + 2 элемента возможного решения.

Проба : Докажем теорему, используя математическую индукцию.

Сначала мы доказываем, что соотношение истинно при k = 0.

Алгоритм начинается с нахождения максимальных элементов набора D , ширины и обновляет значение наборов D и Х . Итак, X 0 0 = {0, ширина } и D 0 0 = D \ { ширина }.Из определения Δ имеем, ΔX 0 0 = { ширина }. Следовательно, D 0 0 = D \ ΔX 0 0 .

Во-вторых, мы предполагаем, что соотношение верно при k (т.е. D i k = D \ ΔX i k ).

В-третьих, докажем, что соотношение истинно при k + 1.

Из алгоритма установлено D j k + 1 может быть построен из узла на уровне k , скажем ( D i k , X i k ).Следовательно, D j k + 1 = D i k \ Δ ( y , X i k ) и X j k + 1 = X i k ∪ { y }.Это означает, что D j k + 1 = ( D \ ΔX i k ) \ Δ ( y , X i k ), потому что D i k = D \ ΔX i k .Следовательно, D j k + 1 = D \ ( ΔX i k + Δ ( y , X i k )) (из предложения 1).Из определения 4 и потому, что X j k + 1 = { y } ∪ X i k , затем D j k + 1 = D \ ΔX к к + 1 .

Теорема 2: Если есть две подзадачи ( D i k , X i k ) и ( D к к , X к к ) такой, что X i k = X к к , затем D i k = D к к .

Проба : Из теоремы 1 верны следующие уравнения D i k = D \ ΔX i k и D к к = D \ ΔX к к , для подзадач ( D i k , X i k ) и ( D к к , X к к ) соответственно.Потому что X i k = X к к , затем D i k = D \ ΔX i k = D \ ΔX к к = D к к .

Следствие 1: Если есть две подзадачи ( D i k , X i k ) и ( D к к , X к к ) такой, что X i k = X к к , затем ( D i k , X i k ) = ( D к к , X к к ).

Окончательный предложенный алгоритм

Мы предложили расширенную версию алгоритма BBb. Предлагаемый алгоритм улучшает время работы и память алгоритма BBb, особенно в худшем случае. В предлагаемом алгоритме мы пытаемся уменьшить потребление памяти алгоритма BBb, не увеличивая время его работы. Улучшенный алгоритм зависит от следующих двух шагов:

  1. 1.

    Построение дерева решений для PDP до достижения определенного уровня α с использованием алгоритма BBb.

  2. 2.

    Для каждого узла на уровне α построение остальных поддеревьев индивидуально с помощью алгоритма BBb.

Рисунок 3 представляет описанную выше идею предлагаемого алгоритма. Мы назвали алгоритм BBb2, b ranch и b ound на основе двухкратного чтения b .

Рис.3

Стратегия алгоритма BBb2

Чтобы определить наилучшее значение α, нам необходимо вычислить сложность памяти предложенного алгоритма для наихудшего случая. Каждый узел на уровне k будет заменен не более чем двумя узлами на уровне k + 1, 0 ≤ k < α . Следовательно, общее количество узлов на уровне α составляет 2 α . В каждом узле храним по два набора, D i α и X i α , общий размер O ( n 2 ).Следовательно, общий объем памяти, необходимый для достижения уровня α , составляет O ( n 2 2 α ) память для BBb2. На втором этапе алгоритма BBb2 мы применяем BBb к каждому узлу индивидуально. Максимальное количество оставшихся уровней составляет n α , а общий объем памяти, необходимый для второго шага в наихудшем случае, составляет o ( n 2 2 n α ).{n- \ alpha} \ right) $$

Let α M — количество уровней, которые приводят к минимальному объему памяти, требуемому BBb2. Значение α M можно вычислить, определив количество уровней α, которое минимизирует потребление памяти M ( α ) для 0 ≤ α n — 1.The Find_α M Процедура вычисляет значение α M для экземпляра n за O ( n ) время. Вход процедуры — размер мультимножества D , N , а выход процедуры — α M . Из размера мультимножества D мы можем вычислить значение n , решив квадратное уравнение \ (\ frac {n \; \ left (n-1 \ right)} {2} = N \).Псевдокод Find_α M процедура выглядит следующим образом:

Процедура Find_α M ( N , α M )

Начать

  1. 1.

    $$ n = \ frac {1+ \ sqrt {1 + 8N}} {2} $$

  2. 2.{n- \ alpha} \ right) $$

  3. 6.

    если M < M мин. , затем

  4. 7.
  5. 8.

    $$ {\ alpha} _M = \ alpha $$

  6. 9.

    конец, если

  7. 10.

    конец для

Конец

В алгоритме BBb2 мы начинаем с нахождения значения α M и затем строим дерево решений до уровня α M достигается за счет использования стратегии в ширину и удаления всех похожих элементов.{\ alpha_M + 2} \),…, 2 n соответственно. Следовательно, BBb2 уменьшает объем памяти, необходимый для алгоритма BBb.

Информационный дайджест, 2020–2021 гг. (NUREG-1350, том 32)

Эта страница содержит ссылки на файлы в формате, отличном от HTML. Дополнительные сведения см. В разделе «Плагины, средства просмотра и другие инструменты».

Информация о публикации

Дата публикации: Октябрь 2020 г.

Управление по связям с общественностью
Комиссия по ядерному регулированию США
Вашингтон, округ Колумбия 20555-0001

Уведомление о доступности

Абстрактные

У.Комиссия по ядерному регулированию (NRC) ежегодно публикует информационный дайджест с 1989 года. Информационный дайджест предоставляет информацию о деятельности агентства и лицензиатах из различных отраслей, которые оно регулирует. Он описывает обязанности и деятельность агентства и предоставляет общую информацию по темам, связанным с ядерной областью. Информационный дайджест включает данные NRC и отрасли в удобном для чтения формате. Инфографика помогает объяснить информацию с помощью наглядных пособий.

Информационный дайджест за 2020–2021 годы включает данные NRC в приложениях и данные, не относящиеся к NRC (e.g., Международное агентство по атомной энергии, Управление энергетической информации и Министерство энергетики США), которые были обновлены по состоянию на 10 августа 2020 г., включая данные, связанные с картами и графикой. Дайджест — это ежегодная публикация с обновлением определенных данных, не относящихся к NRC, каждые 2 года. Следующий информационный дайджест, который будет содержать обновленные данные, будет опубликован в августе 2021 года. Информационный дайджест направит читателей к самой последней информации, доступной в Интернете.

NRC проверяет информацию из отраслевых и международных источников, но не проверяет ее независимо.Указатель веб-ссылок предоставляет источники для получения дополнительной информации по основным темам. NRC является источником всех фотографий, графиков и таблиц, если не указано иное. Вся информация является окончательной, если не указано иное. Любые исправления и обновления будут опубликованы в цифровой версии публикации на веб-сайте NRC.

NRC приветствует комментарии и предложения по информационному дайджесту. Чтобы отправить комментарии, напишите в Управление по связям с общественностью Комиссии по ядерному регулированию США, Вашингтон, округ Колумбия 20555-0001, или по адресу [email protected].

Страница Последняя редакция / обновление 30 марта 2021 г., вторник.

Сайт

Reader’s Digest «расцвел», вырос на 76%: вот как | Что нового в Publishing

В то время, когда многие издатели видят, что посещаемость их онлайн-посетителей падает — в значительной степени из-за «Великого краха Facebook», — существует один значительный издатель, который противостоит этой тенденции.

The Reader’s Digest Association, ныне известная как Trusted Media Brands, Inc., демонстрирует массовый рост цифровой аудитории на .

За последний год аудитория RD.com увеличилась на 76% до 8,3 миллиона уникальных посетителей. Taste of Home — часть Trusted Media Brands и ведущего мирового бренда продуктов питания — также увеличила свою аудиторию на 39% до 12,7 миллиона уникальных посетителей. В целом посетителей на всех сайтах увеличились на 10 миллионов до 56,6 миллионов , что на 20% больше.

Наш трафик действительно вырос!

«Наш трафик действительно вырос и откликнулся на TLC и внимание, которое мы уделили нашим сайтам», — сказал Винс Эррико, директор по цифровым технологиям.

Reader’s Digest, в котором публикуются материалы, посвященные образу жизни, здоровью и благополучию, входит в десятку ведущих брендов журналов, согласно отчету Magazine Media 360 ° от MPA, Ассоциации журнальных СМИ.

Как они это сделали

За последний год в команду было добавлено 60 цифровых сотрудников для создания редакционного, видео и контента для социальных сетей. Сайты были ориентированы на публикацию на статей, ориентированных на цифровую аудиторию, на , а не на печать.В дополнение к этому, Trusted Media Brands объединили все свои веб-сайты на единой серверной платформе, что сделало их более гибкими.

«Наши бренды были недостаточно представлены в Интернете», — сказал Эррико. «Внеся эти изменения, мы смогли охватить нашу аудиторию, которая, вероятно, искала нас , но на самом деле не нашла ».

Доходы от строительства

Издатель также создал новую команду по работе с доходами, чтобы связать рекламодателей с растущей аудиторией.За последний год цифровая выручка выросла на 13%.

«Эти бренды продемонстрировали такой значительный рост, и у нас есть возможность извлечь из этого выгоду», — сказал директор по доходам Зак Фридман.

Данные будут огромной частью наших цифровых продаж.

Например, Trusted Media Brands Inc. хочет поделиться с рекламодателями данными о том, как их клиенты едят и готовят пищу.

«Мы знаем, какие рецепты более популярны в понедельник, чем в среду», — сказал Фридман. «Мы можем выйти и рассказать историю о типах ингредиентов, которые более популярны, когда вы пытаетесь достучаться до наших читателей».

Другим примером является сайт Family Handyman, сбор данных на котором позволит компании связать рекламодателей с различными профессионалами, например, с подрядчиками.

Что дальше?

В следующем году компания продолжит набор сотрудников, добавив 30 сотрудников по вопросам контента и продаж.

Реклама — не единственная стратегия получения дохода, направленная на монетизацию увеличившейся аудитории. .В то время как подписка на журналы и книги рецептов всегда были частью их доходов, компания планирует добавить еще предложений для прямого потребителя и инициативы в области электронной коммерции.

Например, семейный разнорабочий

открыл DIY University , который предлагает платные курсы по ремонту дома.

« Наши читатели — настоящие фанаты с точки зрения того, как долго они остаются с нами», — заключил Эррико , «и они просят больше возможностей для взаимодействия с нами.”

Играя в долгую игру, издатель фокусируется на обслуживании читателей и рекламодателей, в то время как выделяется своей глубокой вовлеченностью , по словам Эррико.

Автор Monojoy Bhattacharjee

Бывший телеведущий и журналист, Моноджой является ветераном индийской издательской индустрии и работал с некоторыми из крупнейших медиакомпаний Азии, включая STAR News | ABP Group и Локмат Медиа. Текущий редактор журнала What’s New in Publishing, Monojoy уделяет внимание последним техническим инновациям и тенденциям в области публикации.

Расщепление протеазой для масс-спектрометрии

Использование трипсина в восходящей протеомике может наложить определенные ограничения на способность захватывать полный протеом. Плотно свернутые белки могут сопротивляться перевариванию трипсином. Посттрансляционные модификации (ПТМ) представляют собой другую проблему для трипсина, поскольку гликаны часто ограничивают доступ трипсина к сайтам расщепления, а ацетилирование делает остатки лизина и аргинина устойчивыми к перевариванию трипсином.

Чтобы преодолеть эти проблемы, сообщество протеомиков начало исследовать альтернативные протеазы, дополняющие трипсин.Однако протоколы, а также ожидаемые результаты, полученные при использовании этих альтернативных протеаз, систематически не документировались.

Giansanti et. al. (2016) были созданы оптимизированные протоколы для шести альтернативных протеаз, которые уже показали многообещающее применение в протеомике, а именно химотрипсин, Lys-C, Lys-N, Asp-N, Glu-C и Arg-C.

В некоторых случаях трипсин не обеспечивает адекватного протеолиза. Например, многие мембранные белки имеют ограниченное количество сайтов расщепления трипсином.В других случаях распределение сайтов расщепления трипсином является субоптимальным, что приводит к образованию пептидов, которые слишком длинные или слишком короткие для масс-спектрометрического анализа. Promega предлагает различные альтернативные протеазы, которые дополняют трипсин и позволяют проводить эффективный анализ белков с помощью масс-спектрометрии. На рисунке 5 показаны преимущества альтернативной протеазы химотрипсина для анализа масс-спектрометрии белков.

Рис. 5. Увеличение покрытия белком при использовании как трипсина, так и химотрипсина.

Сайт-специфические протеазы

Arg-C, класс секвенирования (кат.# V1881), также известная как клострипаин, представляет собой эндопептидазу, которая расщепляет на С-конце остатки аргинина, включая участки рядом с пролином. Активность Arg-C оптимальна при pH 7,6–7,9.

Asp-N, класс секвенирования (№ по каталогу V1621) представляет собой эндопротеиназу, которая гидролизует пептидные связи на N-концевой стороне остатков аспарагиновой кислоты. Активность Asp-N оптимальна при pH 4,0–9,0.

rAsp-N, масс-спектрометрия (Cat. # VA1160) представляет собой рекомбинантную протеазу, которая была клонирована из Stenotrophomonas maltophilia и очищена из E.coli.

Химотрипсин, класс секвенирования (№ по каталогу V1061) представляет собой сериновую эндопротеиназу, полученную из поджелудочной железы крупного рогатого скота. Протеаза предпочтительно гидролизуется на карбоксильной стороне ароматических аминокислот: тирозина, фенилаланина и триптофана. Активность химотрипсина оптимальна при pH 7,0–9,0.

Glu-C, класс секвенирования (№ по каталогу V1651) представляет собой сериновую протеазу, которая расщепляет специфически на С-конце остатков глутаминовой кислоты в присутствии бикарбоната аммония или ацетата аммония.В фосфатных буферах расщепление также происходит по остаткам аспарагиновой кислоты. Активность Glu-C оптимальна при pH 4,0–9,0.

rLys-C, масс-спектрометрия (№ по каталогу V1671) представляет собой рекомбинантную эндопротеиназу Lys-C, экспрессируемую в E. coli. Последовательностью rLys-C является протеаза IV из Pseudomonas aeruginosa. Подобно нативному Lys-C, rLys-C расщепляет на С-конце остатков лизина с исключительной специфичностью и сохраняет протеолитическую активность в денатурирующих условиях. Активность rLys-C оптимальна при pH 8.0–9.0.

Эндопротеиназа Lys-C, масс-спектрометрия (Cat. # VA1170) представляет собой сериновую протеазу высокой степени очистки, которая специфически гидролизуется на карбоксильной стороне лизинов. Lys-C сохраняет протеолитическую активность в условиях сильной денатурирования белка.

Эндопротеиназа Lys-N, масс-спектрометрия (кат. № VA1180) представляет собой металлопротеиназу цинка, которая расщепляется по аминогруппе лизинов. Lys-N, масс-спектрометрия, сохраняет протеолитическую активность в условиях сильной денатурирования белка, таких как 8M мочевина,

Неспецифические протеазы

Эластаз (Кат.# V1891) представляет собой сериновую протеазу, которая предпочтительно расщепляет на С-конце остатки аланина, валина, серина, глицина, лейцина или изолейцина. Активность эластазы оптимальна при pH 9,0.

Пепсин (№ по каталогу V1959) предпочтительно расщепляет на С-конце остатки фенилаланина, лейцина, тирозина и триптофана. Активность пепсина оптимальна при pH 1,0–3,0.

Термолизин (№ по каталогу V4001) представляет собой термостабильную металлопротеиназу. Термолизин предпочтительно расщепляет на N-конце гидрофобных остатков лейцин, фенилаланин, валин, изолейцин, аланин и метионин.Оптимальный диапазон температур разложения составляет 65–85 ° C. Активность термолизина оптимальна при pH 5,0–8,5.

Дайджест

— HTTP | MDN

HTTP-заголовок ответа Digest предоставляет дайджест запрошенного ресурса.

В условиях RFC 7231 это выбирает представление ресурса. Выбранное представление зависит от Content-Type и Кодирование содержимого значения заголовка: поэтому один ресурс может иметь несколько разных значений дайджеста.

Дайджест рассчитывается по всему представлению. Само представительство может быть:

  • полностью содержится в теле ответного сообщения
  • вообще не содержится в теле сообщения (например, в ответе на ГОЛОВКА запрос)
  • частично содержится в теле сообщения (например, в ответе на запрос диапазона).
  Дайджест: <алгоритм-дайджеста> = <значение-дайджеста>

Дайджест:  = ,  = 
  
<алгоритм-дайджест>
Поддерживаемые алгоритмы дайджеста определены в RFC 3230 и RFC 5843 и включают SHA-256 и SHA-512 .Некоторые из поддерживаемых алгоритмов, включая unixsum и MD5 подвержены конфликтам и поэтому не подходит для применений, в которых важна устойчивость к столкновениям.
Результат применения алгоритма дайджеста к представлению ресурса и кодирование результата.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Copyright © 2024 homyrouz.ru — Банкетный зал Хоми Роуз. All rights reserved.
Имя Генотип Как штамм упоминается в тексте
SC5314 UME6: UME6 Дикий тип UME6: UME6 UME -LYS754E LYS755E ume6-EE
DAB894 ume6-LYS754stop: ume6-LYS754stop ume6-stop8 ume6-stop8 фактор важности